蚌埠医学院学报
蚌埠醫學院學報
방부의학원학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE BENGBU
2013年
8期
925-928
,共4页
脊髓损伤%巨噬细胞亚群%流式细胞术%大鼠
脊髓損傷%巨噬細胞亞群%流式細胞術%大鼠
척수손상%거서세포아군%류식세포술%대서
目的:建立检测脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)大鼠局部浸润巨噬细胞亚群的流式细胞术方法.方法:取5只健康雌性SD大鼠,采用纽约大学SCI撞击仪系统制作重物坠落SCI 模型为SCI组;另设5只假手术大鼠为假手术组.SCI术后7 d收集损伤的脊髓,制备单细胞悬液,采用Percoll原液密度梯度离心法浓缩浸润的巨噬细胞.分别以CD68与CD86或CD163的不同荧光标记抗体组合作为鉴定M1和M2型巨噬细胞的标志,用流式细胞术检测损伤局部巨噬细胞亚群的变化.结果:假手术组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞占细胞总数的(0.07±0.02)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(9.90±3.28)%和(4.95±0.17)%;而SCI组大鼠脊髓单细胞悬液中,CD68+细胞的百分比为(0.21±0.09)%,CD86+细胞和CD163+细胞分别占CD68+细胞的(18.71±0.49)%和(27.07±3.74)%,差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01).结论:以小鼠抗大鼠CD68、小鼠抗大鼠CD86、小鼠抗大鼠CD163为标志,采用流式细胞术可以成功检测SCI局部浸润的M1和M2型巨噬细胞亚群.
目的:建立檢測脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)大鼠跼部浸潤巨噬細胞亞群的流式細胞術方法.方法:取5隻健康雌性SD大鼠,採用紐約大學SCI撞擊儀繫統製作重物墜落SCI 模型為SCI組;另設5隻假手術大鼠為假手術組.SCI術後7 d收集損傷的脊髓,製備單細胞懸液,採用Percoll原液密度梯度離心法濃縮浸潤的巨噬細胞.分彆以CD68與CD86或CD163的不同熒光標記抗體組閤作為鑒定M1和M2型巨噬細胞的標誌,用流式細胞術檢測損傷跼部巨噬細胞亞群的變化.結果:假手術組大鼠脊髓單細胞懸液中,CD68+細胞佔細胞總數的(0.07±0.02)%,CD86+細胞和CD163+細胞分彆佔CD68+細胞的(9.90±3.28)%和(4.95±0.17)%;而SCI組大鼠脊髓單細胞懸液中,CD68+細胞的百分比為(0.21±0.09)%,CD86+細胞和CD163+細胞分彆佔CD68+細胞的(18.71±0.49)%和(27.07±3.74)%,差異均有統計學意義(P<0.05~P<0.01).結論:以小鼠抗大鼠CD68、小鼠抗大鼠CD86、小鼠抗大鼠CD163為標誌,採用流式細胞術可以成功檢測SCI跼部浸潤的M1和M2型巨噬細胞亞群.
목적:건립검측척수손상(spinal cord injury,SCI)대서국부침윤거서세포아군적류식세포술방법.방법:취5지건강자성SD대서,채용뉴약대학SCI당격의계통제작중물추락SCI 모형위SCI조;령설5지가수술대서위가수술조.SCI술후7 d수집손상적척수,제비단세포현액,채용Percoll원액밀도제도리심법농축침윤적거서세포.분별이CD68여CD86혹CD163적불동형광표기항체조합작위감정M1화M2형거서세포적표지,용류식세포술검측손상국부거서세포아군적변화.결과:가수술조대서척수단세포현액중,CD68+세포점세포총수적(0.07±0.02)%,CD86+세포화CD163+세포분별점CD68+세포적(9.90±3.28)%화(4.95±0.17)%;이SCI조대서척수단세포현액중,CD68+세포적백분비위(0.21±0.09)%,CD86+세포화CD163+세포분별점CD68+세포적(18.71±0.49)%화(27.07±3.74)%,차이균유통계학의의(P<0.05~P<0.01).결론:이소서항대서CD68、소서항대서CD86、소서항대서CD163위표지,채용류식세포술가이성공검측SCI국부침윤적M1화M2형거서세포아군.