CAJ | 학술논문

目的:通过比较几种肝脏淋巴细胞分离方法得到的总淋巴细胞、T细胞、自然杀伤T细胞(NKT cells)及自然杀伤细胞(NK细胞)的比例和细胞绝对数,明确各种方法的适用范围.方法:按照析因设计,将不放血(A法)、摘眼球放血(B法)、体循环灌流(C法)、摘眼球结合体循环灌流(B法+C法)4种肝脏预处理方法和单浓度离心法(Ⅰ法)、非连续密度梯度离心法(Ⅱ法)2种Percoll分离方法进行全面组合,共获得8种组合条件,分离小鼠肝脏淋巴细胞,用流式细胞术检测各类型细胞比例.结果:肝脏预处理方法中B法+C法获得淋巴细胞比例最高,A法获得淋巴细胞绝对数最高,B法获得的NKT细胞和NK细胞比例和细胞绝对数均最高;Ⅱ法获得的淋巴细胞、T细胞、NKT细胞和NK细胞比例和细胞绝对数均高于Ⅰ法.对于NKT细胞比例和NK细胞绝对数,肝脏预处理方法和Percoll浓度之间有交互作用(P＜0.01和P＜0.05),其他均无交互作用(P＞0.05).结论:采用摘眼球放血结合体循环灌流法,结合Percoll非连续密度梯度法(33%+70%),可获得较高数量和比例的固有免疫细胞,有助于对肝脏固有免疫细胞如NKT细胞、NK细胞等的研究.
목적:통과비교궤충간장림파세포분리방법득도적총림파세포、T세포、자연살상T세포(NKT cells)급자연살상세포(NK세포)적비례화세포절대수,명학각충방법적괄용범위.방법:안조석인설계,장불방혈(A법)、적안구방혈(B법)、체순배관류(C법)、적안구결합체순배관류(B법+C법)4충간장예처리방법화단농도리심법(Ⅰ법)、비련속밀도제도리심법(Ⅱ법)2충Percoll분리방법진행전면조합,공획득8충조합조건,분리소서간장림파세포,용류식세포술검측각류형세포비례.결과:간장예처리방법중B법+C법획득림파세포비례최고,A법획득림파세포절대수최고,B법획득적NKT세포화NK세포비례화세포절대수균최고;Ⅱ법획득적림파세포、T세포、NKT세포화NK세포비례화세포절대수균고우Ⅰ법.대우NKT세포비례화NK세포절대수,간장예처리방법화Percoll농도지간유교호작용(P＜0.01화P＜0.05),기타균무교호작용(P＞0.05).결론:채용적안구방혈결합체순배관류법,결합Percoll비련속밀도제도법(33%+70%),가획득교고수량화비례적고유면역세포,유조우대간장고유면역세포여NKT세포、NK세포등적연구.