广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
16期
2458-2461
,共4页
许琴英%朱家勇%金小宝%徐建华
許琴英%硃傢勇%金小寶%徐建華
허금영%주가용%금소보%서건화
抗菌肽%表达%活性%Defensin
抗菌肽%錶達%活性%Defensin
항균태%표체%활성%Defensin
目的 优化家蝇Defensin基因原核表达条件,并初步研究其抑菌活性.方法 Defensin基因成熟肽被克隆入pGEX-4T-1原核表达载体中,构建重组质粒pGEX-4T-1/Defensin,并转化宿主菌后诱导表达,表达过程中对菌液起始浓度、IPTG浓度、诱导温度和时间进行优化.采用亲和层析法分离纯化融合蛋白,SDS-PAGE鉴定目的 蛋白的表达情况和分子量.用凝血酶切除谷胱甘肽标签,并通过体外抑菌实验检测其抗菌活性.结果 成功构建重组质粒pGEX-4T-1/Defensin,目的 基因能够在大肠埃希菌内高效表达,分子量为4 kD,与预期值一致,表达量约达40%.抑菌实验显示其对大肠埃希菌K12D31生长有一定的抑制作用.结论 本实验为家蝇Defensin基因功能的深入研究奠定了工作基础.
目的 優化傢蠅Defensin基因原覈錶達條件,併初步研究其抑菌活性.方法 Defensin基因成熟肽被剋隆入pGEX-4T-1原覈錶達載體中,構建重組質粒pGEX-4T-1/Defensin,併轉化宿主菌後誘導錶達,錶達過程中對菌液起始濃度、IPTG濃度、誘導溫度和時間進行優化.採用親和層析法分離純化融閤蛋白,SDS-PAGE鑒定目的 蛋白的錶達情況和分子量.用凝血酶切除穀胱甘肽標籤,併通過體外抑菌實驗檢測其抗菌活性.結果 成功構建重組質粒pGEX-4T-1/Defensin,目的 基因能夠在大腸埃希菌內高效錶達,分子量為4 kD,與預期值一緻,錶達量約達40%.抑菌實驗顯示其對大腸埃希菌K12D31生長有一定的抑製作用.結論 本實驗為傢蠅Defensin基因功能的深入研究奠定瞭工作基礎.
목적 우화가승Defensin기인원핵표체조건,병초보연구기억균활성.방법 Defensin기인성숙태피극륭입pGEX-4T-1원핵표체재체중,구건중조질립pGEX-4T-1/Defensin,병전화숙주균후유도표체,표체과정중대균액기시농도、IPTG농도、유도온도화시간진행우화.채용친화층석법분리순화융합단백,SDS-PAGE감정목적 단백적표체정황화분자량.용응혈매절제곡광감태표첨,병통과체외억균실험검측기항균활성.결과 성공구건중조질립pGEX-4T-1/Defensin,목적 기인능구재대장애희균내고효표체,분자량위4 kD,여예기치일치,표체량약체40%.억균실험현시기대대장애희균K12D31생장유일정적억제작용.결론 본실험위가승Defensin기인공능적심입연구전정료공작기출.
