中国肺癌杂志
中國肺癌雜誌
중국폐암잡지
CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
2013年
7期
339-344
,共6页
申健%何靖康%唐兴%韩蓉%李睿%徐澄澄%吴亚娟
申健%何靖康%唐興%韓蓉%李睿%徐澄澄%吳亞娟
신건%하정강%당흥%한용%리예%서징징%오아연
眼镜蛇神经毒素%人肺A549腺癌细胞%自噬%P38-MAPK
眼鏡蛇神經毒素%人肺A549腺癌細胞%自噬%P38-MAPK
안경사신경독소%인폐A549선암세포%자서%P38-MAPK
Cobrotoxin%Anti-tumor%Autophagy%P38-MARK
背景与目的 已有的研究表明眼镜蛇神经毒素具有抗肿瘤作用,而其在肺癌中的作用罕有研究.本研究观察cobrotoxin对人肺A549腺癌细胞株的抗肿瘤作用,探讨自噬和P38-MAPK通路在这过程中的作用.方法 应用MTT法观察cobrotoxin对A549细胞和HFL1人肺成纤维细胞的生长抑制作用以及用3-MA抑制自噬、SB203580抑制P38-MAPK通路后cobrotoxin对A549细胞的生长抑制作用；应用细胞集落平板克隆实验检测cobrotoxin对A549细胞的集落形成的影响；蛋白免疫印迹法(Western blot)测定单独cobrotoxin作用、cobrotoxin分别联合3-MA抑制自噬和SB203580抑制P38-MAPK通路活性后A549细胞内beclin-1、LC3、P62、P38及pP38等蛋白表达水平.结果 不同浓度cobrotoxin对A549细胞的生长有明显抑制作用,对HFL1人肺成纤维细胞无明显抑制作用,3-MA、SB203580作用后cobrotoxin对A549细胞的抑制作用降低；不同浓度cobrotoxin可明显抑制A549细胞的集落形成；cobrotoxin作用后beclin-1、pP38蛋白表达水平明显提高,P62表达明显降低,Ⅱ型/Ⅰ型LC3比值增大,并有浓度依赖性,3-MA抑制自噬后beclin-1蛋白表达水平降低,P62表达增高、Ⅱ型/Ⅰ型LC3比值减小,SB203580抑制P38-MAPK通路后beclin-1、pP38蛋白表达水平降低,Ⅱ型/Ⅰ型LC3比值减小.结论 cobrotoxin对人肺A549腺癌细胞体外生长有抑制作用,可能通过活化P38-MAPK通路激活自噬参与抗肿瘤过程.
揹景與目的 已有的研究錶明眼鏡蛇神經毒素具有抗腫瘤作用,而其在肺癌中的作用罕有研究.本研究觀察cobrotoxin對人肺A549腺癌細胞株的抗腫瘤作用,探討自噬和P38-MAPK通路在這過程中的作用.方法 應用MTT法觀察cobrotoxin對A549細胞和HFL1人肺成纖維細胞的生長抑製作用以及用3-MA抑製自噬、SB203580抑製P38-MAPK通路後cobrotoxin對A549細胞的生長抑製作用；應用細胞集落平闆剋隆實驗檢測cobrotoxin對A549細胞的集落形成的影響；蛋白免疫印跡法(Western blot)測定單獨cobrotoxin作用、cobrotoxin分彆聯閤3-MA抑製自噬和SB203580抑製P38-MAPK通路活性後A549細胞內beclin-1、LC3、P62、P38及pP38等蛋白錶達水平.結果 不同濃度cobrotoxin對A549細胞的生長有明顯抑製作用,對HFL1人肺成纖維細胞無明顯抑製作用,3-MA、SB203580作用後cobrotoxin對A549細胞的抑製作用降低；不同濃度cobrotoxin可明顯抑製A549細胞的集落形成；cobrotoxin作用後beclin-1、pP38蛋白錶達水平明顯提高,P62錶達明顯降低,Ⅱ型/Ⅰ型LC3比值增大,併有濃度依賴性,3-MA抑製自噬後beclin-1蛋白錶達水平降低,P62錶達增高、Ⅱ型/Ⅰ型LC3比值減小,SB203580抑製P38-MAPK通路後beclin-1、pP38蛋白錶達水平降低,Ⅱ型/Ⅰ型LC3比值減小.結論 cobrotoxin對人肺A549腺癌細胞體外生長有抑製作用,可能通過活化P38-MAPK通路激活自噬參與抗腫瘤過程.
배경여목적 이유적연구표명안경사신경독소구유항종류작용,이기재폐암중적작용한유연구.본연구관찰cobrotoxin대인폐A549선암세포주적항종류작용,탐토자서화P38-MAPK통로재저과정중적작용.방법 응용MTT법관찰cobrotoxin대A549세포화HFL1인폐성섬유세포적생장억제작용이급용3-MA억제자서、SB203580억제P38-MAPK통로후cobrotoxin대A549세포적생장억제작용；응용세포집락평판극륭실험검측cobrotoxin대A549세포적집락형성적영향；단백면역인적법(Western blot)측정단독cobrotoxin작용、cobrotoxin분별연합3-MA억제자서화SB203580억제P38-MAPK통로활성후A549세포내beclin-1、LC3、P62、P38급pP38등단백표체수평.결과 불동농도cobrotoxin대A549세포적생장유명현억제작용,대HFL1인폐성섬유세포무명현억제작용,3-MA、SB203580작용후cobrotoxin대A549세포적억제작용강저；불동농도cobrotoxin가명현억제A549세포적집락형성；cobrotoxin작용후beclin-1、pP38단백표체수평명현제고,P62표체명현강저,Ⅱ형/Ⅰ형LC3비치증대,병유농도의뢰성,3-MA억제자서후beclin-1단백표체수평강저,P62표체증고、Ⅱ형/Ⅰ형LC3비치감소,SB203580억제P38-MAPK통로후beclin-1、pP38단백표체수평강저,Ⅱ형/Ⅰ형LC3비치감소.결론 cobrotoxin대인폐A549선암세포체외생장유억제작용,가능통과활화P38-MAPK통로격활자서삼여항종류과정.
