医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2013年
7期
58-61
,共4页
慢病毒%转染%细胞融合%染色体%细胞周期
慢病毒%轉染%細胞融閤%染色體%細胞週期
만병독%전염%세포융합%염색체%세포주기
Lentivirus%Transfection%Cell fusion%Chromosome%Cell cycle
目的 通过实验观察无外源基因的慢病毒颗粒对HEK-293细胞产生的生物学影响,为选择以何种方式获得重组慢病毒感染的目的细胞提供基础依据.方法 以pLentiLox3.7慢病毒核心空载体和包装质粒VSVG、RSV-REV和pMDLg/pRRE按一定比例混合,采用脂质体共转染,将慢病毒载体系统的4质粒共转染HEK-293T细胞,收获病毒原液,再以浓缩的病毒原液或等体积的培养基加入培养中的HEK-293细胞,观察细胞的形态变化,分析其染色体并采用流式细胞术分析细胞周期.结果 按照本实验中慢病毒包装的质粒比例及包装过程获得的浓缩病毒液使得HEK-293细胞具有融合趋势,染色体分析后表明细胞尚未真正融合,但流式分析显示一定量的慢病毒可使得S期的细胞比例显著增多.结论 一定量的慢病毒对细胞具有融合趋势,建议取低浓度含有荧光筛选标签的重组慢病毒感染目的细胞,培养之后再进行流式无菌分选以获得较纯的目的细胞.
目的 通過實驗觀察無外源基因的慢病毒顆粒對HEK-293細胞產生的生物學影響,為選擇以何種方式穫得重組慢病毒感染的目的細胞提供基礎依據.方法 以pLentiLox3.7慢病毒覈心空載體和包裝質粒VSVG、RSV-REV和pMDLg/pRRE按一定比例混閤,採用脂質體共轉染,將慢病毒載體繫統的4質粒共轉染HEK-293T細胞,收穫病毒原液,再以濃縮的病毒原液或等體積的培養基加入培養中的HEK-293細胞,觀察細胞的形態變化,分析其染色體併採用流式細胞術分析細胞週期.結果 按照本實驗中慢病毒包裝的質粒比例及包裝過程穫得的濃縮病毒液使得HEK-293細胞具有融閤趨勢,染色體分析後錶明細胞尚未真正融閤,但流式分析顯示一定量的慢病毒可使得S期的細胞比例顯著增多.結論 一定量的慢病毒對細胞具有融閤趨勢,建議取低濃度含有熒光篩選標籤的重組慢病毒感染目的細胞,培養之後再進行流式無菌分選以穫得較純的目的細胞.
목적 통과실험관찰무외원기인적만병독과립대HEK-293세포산생적생물학영향,위선택이하충방식획득중조만병독감염적목적세포제공기출의거.방법 이pLentiLox3.7만병독핵심공재체화포장질립VSVG、RSV-REV화pMDLg/pRRE안일정비례혼합,채용지질체공전염,장만병독재체계통적4질립공전염HEK-293T세포,수획병독원액,재이농축적병독원액혹등체적적배양기가입배양중적HEK-293세포,관찰세포적형태변화,분석기염색체병채용류식세포술분석세포주기.결과 안조본실험중만병독포장적질립비례급포장과정획득적농축병독액사득HEK-293세포구유융합추세,염색체분석후표명세포상미진정융합,단류식분석현시일정량적만병독가사득S기적세포비례현저증다.결론 일정량적만병독대세포구유융합추세,건의취저농도함유형광사선표첨적중조만병독감염목적세포,배양지후재진행류식무균분선이획득교순적목적세포.
