中国医科大学学报
中國醫科大學學報
중국의과대학학보
JOURNAL OF CHINA MEDICAL UNIVERSITY
2013年
8期
726-729
,共4页
祁馨卉%崔慧霞%马楠%姜又红
祁馨卉%崔慧霞%馬楠%薑又紅
기형훼%최혜하%마남%강우홍
GPC3%RNA干扰%慢病毒载体
GPC3%RNA榦擾%慢病毒載體
GPC3%RNA간우%만병독재체
GPC3%RNAi%lentiviral vector
目的 构建含有GPC3的shRNA序列慢病毒表达载体并转染肝癌细胞,观察其转染效率及在肝癌细胞中的表达.方法 应用重组DNA技术,将设计好的GPC3基因特异性siRNA序列构建至慢病毒表达载体pGLV3-GFP上,并应用脂质体法转染293T细胞,进行病毒包装及滴度测定.采用RT-PCR及Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测转染HepG2细胞后GPC3基因的表达情况.结果 慢病毒载体构建成功,并测定滴度为1×108TU/mL,转染后,GPC3基因表达明显降低.结论 成功构建GPC3基因的shRNA慢病毒载体,所介导的RNAi能有效抑制靶细胞中GPC3基因的表达.
目的 構建含有GPC3的shRNA序列慢病毒錶達載體併轉染肝癌細胞,觀察其轉染效率及在肝癌細胞中的錶達.方法 應用重組DNA技術,將設計好的GPC3基因特異性siRNA序列構建至慢病毒錶達載體pGLV3-GFP上,併應用脂質體法轉染293T細胞,進行病毒包裝及滴度測定.採用RT-PCR及Western blot分彆從mRNA和蛋白水平檢測轉染HepG2細胞後GPC3基因的錶達情況.結果 慢病毒載體構建成功,併測定滴度為1×108TU/mL,轉染後,GPC3基因錶達明顯降低.結論 成功構建GPC3基因的shRNA慢病毒載體,所介導的RNAi能有效抑製靶細胞中GPC3基因的錶達.
목적 구건함유GPC3적shRNA서렬만병독표체재체병전염간암세포,관찰기전염효솔급재간암세포중적표체.방법 응용중조DNA기술,장설계호적GPC3기인특이성siRNA서렬구건지만병독표체재체pGLV3-GFP상,병응용지질체법전염293T세포,진행병독포장급적도측정.채용RT-PCR급Western blot분별종mRNA화단백수평검측전염HepG2세포후GPC3기인적표체정황.결과 만병독재체구건성공,병측정적도위1×108TU/mL,전염후,GPC3기인표체명현강저.결론 성공구건GPC3기인적shRNA만병독재체,소개도적RNAi능유효억제파세포중GPC3기인적표체.
