中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
8期
684-686
,共3页
曹俊%陈利苹%刘银冰%鄢秋龙%刘思国
曹俊%陳利蘋%劉銀冰%鄢鞦龍%劉思國
조준%진리평%류은빙%언추룡%류사국
结核分枝杆菌%rv3036c基因%原核表达%多克隆抗体
結覈分枝桿菌%rv3036c基因%原覈錶達%多剋隆抗體
결핵분지간균%rv3036c기인%원핵표체%다극륭항체
Mycobacterium tuberculosis%rv3036c gene%prokaryotic expression%polyclonal antibody
为制备结核分枝杆菌(Mtb) rv3036c基因的多克隆抗体,本研究以Mtb强毒株H37Rv基因组DNA为模板,扩增rv3036c基因,克隆至表达载体pET-28a(+)中,构建重组质粒pET-rv3036c,并转化大肠杆菌BL21(DE3),经1 mmol/L IPTG诱导表达组氨酸标签融合蛋白Rv3036c,采用Ni-NTA His-Bind Resin纯化目的蛋白,经western blot验证纯化蛋白.将Rv3036c蛋白纯化产物免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.SDS-PAGE和western blot分析结果表明,Rv3036c以可溶形式表达,蛋白分子量大小为28 ku,并且具有良好的免疫原性.以上结果为进一步研究rv3036c基因在Mtb的致病性作用奠定了基础.
為製備結覈分枝桿菌(Mtb) rv3036c基因的多剋隆抗體,本研究以Mtb彊毒株H37Rv基因組DNA為模闆,擴增rv3036c基因,剋隆至錶達載體pET-28a(+)中,構建重組質粒pET-rv3036c,併轉化大腸桿菌BL21(DE3),經1 mmol/L IPTG誘導錶達組氨痠標籤融閤蛋白Rv3036c,採用Ni-NTA His-Bind Resin純化目的蛋白,經western blot驗證純化蛋白.將Rv3036c蛋白純化產物免疫新西蘭大白兔,製備多剋隆抗體.SDS-PAGE和western blot分析結果錶明,Rv3036c以可溶形式錶達,蛋白分子量大小為28 ku,併且具有良好的免疫原性.以上結果為進一步研究rv3036c基因在Mtb的緻病性作用奠定瞭基礎.
위제비결핵분지간균(Mtb) rv3036c기인적다극륭항체,본연구이Mtb강독주H37Rv기인조DNA위모판,확증rv3036c기인,극륭지표체재체pET-28a(+)중,구건중조질립pET-rv3036c,병전화대장간균BL21(DE3),경1 mmol/L IPTG유도표체조안산표첨융합단백Rv3036c,채용Ni-NTA His-Bind Resin순화목적단백,경western blot험증순화단백.장Rv3036c단백순화산물면역신서란대백토,제비다극륭항체.SDS-PAGE화western blot분석결과표명,Rv3036c이가용형식표체,단백분자량대소위28 ku,병차구유량호적면역원성.이상결과위진일보연구rv3036c기인재Mtb적치병성작용전정료기출.
