CAJ | 학술논문

为建立鸭源鸡杆菌(G.anatis)双重PCR检测方法,并对鸡杆菌分离株进行种类鉴定,本研究根据GenBank中G.anatis12656-12株的gtxA基因序列设计一对PCR引物,合成扩增rpoB基因的引物作为内参基因,建立了G.anatis双重PCR检测方法.检测结果显示:以G.anatis Yu-PDS-RZ-1-SLG株DNA为模板进行的双重PCR检测能够扩增出两条目的片段;其它16株细菌包括副鸡禽杆菌、多杀性巴氏杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、福氏志贺菌和奇异变形杆菌均只扩增出了一条目的片段;该方法可以检测到浓度为6.5×102 cfu/mL的G.anatis;34株鸡杆菌分离株均扩增出了两条预期大小的目的片段.此外,序列分析结果表明,10株鸡杆菌河南分离株的rpoB基因序列与鸭源鸡杆菌种参考株(CCUG15563)的同源性最高(97.5％～99.0％),属于鸭源鸡杆菌种.本研究建立的G.anatis双重PCR检测方法,可用于含gtxA基因鸡杆菌菌株的鉴定及临床病原学诊断.
위건립압원계간균(G.anatis)쌍중PCR검측방법,병대계간균분리주진행충류감정,본연구근거GenBank중G.anatis12656-12주적gtxA기인서렬설계일대PCR인물,합성확증rpoB기인적인물작위내삼기인,건립료G.anatis쌍중PCR검측방법.검측결과현시:이G.anatis Yu-PDS-RZ-1-SLG주DNA위모판진행적쌍중PCR검측능구확증출량조목적편단;기타16주세균포괄부계금간균、다살성파씨간균、대장간균、사문씨균、복씨지하균화기이변형간균균지확증출료일조목적편단;해방법가이검측도농도위6.5×102 cfu/mL적G.anatis;34주계간균분리주균확증출료량조예기대소적목적편단.차외,서렬분석결과표명,10주계간균하남분리주적rpoB기인서렬여압원계간균충삼고주(CCUG15563)적동원성최고(97.5％～99.0％),속우압원계간균충.본연구건립적G.anatis쌍중PCR검측방법,가용우함gtxA기인계간균균주적감정급림상병원학진단.