中国脑血管病杂志
中國腦血管病雜誌
중국뇌혈관병잡지
CHINESE JOURNAL OF CEREBROVASCULAR DISEASES
2013年
8期
416-420
,共5页
李维德%孙青%李松%杭春华
李維德%孫青%李鬆%杭春華
리유덕%손청%리송%항춘화
蛛网膜下腔出血%脑红蛋白%蛋白质印迹法%免疫组织化学%实时荧光定量逆转录聚合酶链反应%大鼠
蛛網膜下腔齣血%腦紅蛋白%蛋白質印跡法%免疫組織化學%實時熒光定量逆轉錄聚閤酶鏈反應%大鼠
주망막하강출혈%뇌홍단백%단백질인적법%면역조직화학%실시형광정량역전록취합매련반응%대서
Subarachnoid hemorrhage%Neuroglobin%Western blotting%Immunohistochemistry%Real-time reverse transcription polymerase chain reaction%Rats
目的 研究脑红蛋白(Ngb)在大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)模型脑组织中的表达.方法 将成年雄性Sprague-Dawley大鼠84只,随机分为对照组(12只)和SAH组(72只),SAH组再分为模型建立后3、6、12、24、48及72 h共6个亚组(每组12只).通过改良后视交叉池注血法建立大鼠SAH模型.应用Western Blot、实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和免疫组化法,检测SAH后不同时间点脑组织中Ngb蛋白及其mRNA的表达水平水平变化和分布.结果 ①Western Blot结果显示,大鼠正常脑组织中Ngb含量较少(0.56±0.14).SAH后3h脑组织中Ngb表达蛋白水平开始升高(0.77 ±0.16),24 h达到高峰(1.27 ±0.18),与对照组比较,差异有统计学意义,P＜0.05;其后逐渐下降.②实时荧光定量RT-PCR结果显示,大鼠脑组织Ngb mRNA从SAH后3h开始增加,6h达高峰,随后逐渐下降,至72 h基本下降到对照组水平.其中6h及12h组与对照组相比,差异有统计学意义,均P＜0.01.③免疫组化染色结果显示,对照组大鼠脑组织中有少量Ngb表达阳性细胞,但多呈弱阳性表达,且在颞叶皮质表达较多,海马区也有少量表达；SAH后Ngb阳性细胞明显增多,并且多数呈强阳性表达,在颞叶皮质增高最明显.结论 大鼠SAH后脑组织内Ngb蛋白及mRNA水平表达均上调,提示Ngb可能参与对SAH后早期脑损伤的保护作用.
目的 研究腦紅蛋白(Ngb)在大鼠蛛網膜下腔齣血(SAH)模型腦組織中的錶達.方法 將成年雄性Sprague-Dawley大鼠84隻,隨機分為對照組(12隻)和SAH組(72隻),SAH組再分為模型建立後3、6、12、24、48及72 h共6箇亞組(每組12隻).通過改良後視交扠池註血法建立大鼠SAH模型.應用Western Blot、實時熒光定量逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)法和免疫組化法,檢測SAH後不同時間點腦組織中Ngb蛋白及其mRNA的錶達水平水平變化和分佈.結果 ①Western Blot結果顯示,大鼠正常腦組織中Ngb含量較少(0.56±0.14).SAH後3h腦組織中Ngb錶達蛋白水平開始升高(0.77 ±0.16),24 h達到高峰(1.27 ±0.18),與對照組比較,差異有統計學意義,P＜0.05;其後逐漸下降.②實時熒光定量RT-PCR結果顯示,大鼠腦組織Ngb mRNA從SAH後3h開始增加,6h達高峰,隨後逐漸下降,至72 h基本下降到對照組水平.其中6h及12h組與對照組相比,差異有統計學意義,均P＜0.01.③免疫組化染色結果顯示,對照組大鼠腦組織中有少量Ngb錶達暘性細胞,但多呈弱暘性錶達,且在顳葉皮質錶達較多,海馬區也有少量錶達；SAH後Ngb暘性細胞明顯增多,併且多數呈彊暘性錶達,在顳葉皮質增高最明顯.結論 大鼠SAH後腦組織內Ngb蛋白及mRNA水平錶達均上調,提示Ngb可能參與對SAH後早期腦損傷的保護作用.
목적 연구뇌홍단백(Ngb)재대서주망막하강출혈(SAH)모형뇌조직중적표체.방법 장성년웅성Sprague-Dawley대서84지,수궤분위대조조(12지)화SAH조(72지),SAH조재분위모형건립후3、6、12、24、48급72 h공6개아조(매조12지).통과개량후시교차지주혈법건립대서SAH모형.응용Western Blot、실시형광정량역전록취합매련반응(RT-PCR)법화면역조화법,검측SAH후불동시간점뇌조직중Ngb단백급기mRNA적표체수평수평변화화분포.결과 ①Western Blot결과현시,대서정상뇌조직중Ngb함량교소(0.56±0.14).SAH후3h뇌조직중Ngb표체단백수평개시승고(0.77 ±0.16),24 h체도고봉(1.27 ±0.18),여대조조비교,차이유통계학의의,P＜0.05;기후축점하강.②실시형광정량RT-PCR결과현시,대서뇌조직Ngb mRNA종SAH후3h개시증가,6h체고봉,수후축점하강,지72 h기본하강도대조조수평.기중6h급12h조여대조조상비,차이유통계학의의,균P＜0.01.③면역조화염색결과현시,대조조대서뇌조직중유소량Ngb표체양성세포,단다정약양성표체,차재섭협피질표체교다,해마구야유소량표체；SAH후Ngb양성세포명현증다,병차다수정강양성표체,재섭협피질증고최명현.결론 대서SAH후뇌조직내Ngb단백급mRNA수평표체균상조,제시Ngb가능삼여대SAH후조기뇌손상적보호작용.
