中国药物与临床
中國藥物與臨床
중국약물여림상
CHINESE REMEDIES & CLINICS
2013年
z1期
1-3
,共3页
张丽%关晓明%马迅%满孝旭%赵胜
張麗%關曉明%馬迅%滿孝旭%趙勝
장려%관효명%마신%만효욱%조성
椎间盘%髓核细胞%致癌性试验
椎間盤%髓覈細胞%緻癌性試驗
추간반%수핵세포%치암성시험
Interveriebral disk%Nucleus pulposus cell%Carcinogenicity tests
目的 验证人髓核细胞感染人端粒酶反转录酶(hTERT)基因后,髓核细胞基本特性是否发生改变,是否具有致瘤性.方法 慢病毒介导hTERT基因感染人髓核细胞并进行蛋白印迹法验证,倒置显微镜观察感染hTERT基因前后髓核细胞形态以及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,流式细胞术测定感染前后人髓核细胞CD24表达,以Hela细胞为对照,将髓核细胞注射裸鼠背部皮下,定期肉眼观察成瘤情况,2个月后取材行苏木素-伊红(HE)染色鉴定.结果 感染hTERT后蛋白印迹法验证人髓核细胞hTERT基因表达阳性,感染前后髓核细胞形态及Ⅱ型胶原免疫组织化学染色无明显变化,呈三角形或多边形贴壁生长,Ⅱ型胶原染色均为阳性;流式细胞术检测感染hTERT前后髓核细胞CD24表达均为阳性,阳性率>50%;致瘤性实验结果显示,注射Hela细胞的裸鼠背部皮下长出肿块,肿块组织经石蜡包埋切片后HE染色,染色为深紫色肿瘤细胞,注射髓核细胞的裸鼠未观察到肿物,取注射部位组织行HE染色,结果为浅红色正常组织.结论 慢病毒介导hTERT基因感染人髓核细胞后,人髓核细胞基本特性没有发生明显变化,且不具有致瘤性,为深入研究髓核细胞奠定基础.
目的 驗證人髓覈細胞感染人耑粒酶反轉錄酶(hTERT)基因後,髓覈細胞基本特性是否髮生改變,是否具有緻瘤性.方法 慢病毒介導hTERT基因感染人髓覈細胞併進行蛋白印跡法驗證,倒置顯微鏡觀察感染hTERT基因前後髓覈細胞形態以及Ⅱ型膠原免疫組織化學染色,流式細胞術測定感染前後人髓覈細胞CD24錶達,以Hela細胞為對照,將髓覈細胞註射裸鼠揹部皮下,定期肉眼觀察成瘤情況,2箇月後取材行囌木素-伊紅(HE)染色鑒定.結果 感染hTERT後蛋白印跡法驗證人髓覈細胞hTERT基因錶達暘性,感染前後髓覈細胞形態及Ⅱ型膠原免疫組織化學染色無明顯變化,呈三角形或多邊形貼壁生長,Ⅱ型膠原染色均為暘性;流式細胞術檢測感染hTERT前後髓覈細胞CD24錶達均為暘性,暘性率>50%;緻瘤性實驗結果顯示,註射Hela細胞的裸鼠揹部皮下長齣腫塊,腫塊組織經石蠟包埋切片後HE染色,染色為深紫色腫瘤細胞,註射髓覈細胞的裸鼠未觀察到腫物,取註射部位組織行HE染色,結果為淺紅色正常組織.結論 慢病毒介導hTERT基因感染人髓覈細胞後,人髓覈細胞基本特性沒有髮生明顯變化,且不具有緻瘤性,為深入研究髓覈細胞奠定基礎.
목적 험증인수핵세포감염인단립매반전록매(hTERT)기인후,수핵세포기본특성시부발생개변,시부구유치류성.방법 만병독개도hTERT기인감염인수핵세포병진행단백인적법험증,도치현미경관찰감염hTERT기인전후수핵세포형태이급Ⅱ형효원면역조직화학염색,류식세포술측정감염전후인수핵세포CD24표체,이Hela세포위대조,장수핵세포주사라서배부피하,정기육안관찰성류정황,2개월후취재행소목소-이홍(HE)염색감정.결과 감염hTERT후단백인적법험증인수핵세포hTERT기인표체양성,감염전후수핵세포형태급Ⅱ형효원면역조직화학염색무명현변화,정삼각형혹다변형첩벽생장,Ⅱ형효원염색균위양성;류식세포술검측감염hTERT전후수핵세포CD24표체균위양성,양성솔>50%;치류성실험결과현시,주사Hela세포적라서배부피하장출종괴,종괴조직경석사포매절편후HE염색,염색위심자색종류세포,주사수핵세포적라서미관찰도종물,취주사부위조직행HE염색,결과위천홍색정상조직.결론 만병독개도hTERT기인감염인수핵세포후,인수핵세포기본특성몰유발생명현변화,차불구유치류성,위심입연구수핵세포전정기출.