CAJ | 학술논문

目的:探讨溶血磷脂酸(LPA)对心肌细胞缺氧/复氧诱导损伤的保护作用及机制.方法:建立H9c2心肌细胞和原代乳鼠心肌细胞缺氧/复氧模型.实验分组:对照组:不做任何处理；缺氧/复氧组(H/R组):无血清培养的细胞在缺氧罐中缺氧24 h后,换含10％胎牛血清的DMEM培养液在常氧条件下培养3h;LPA预处理组(H/R+LPA组)和LPA3受体特异激动剂(OMPT)预处理组(H/R+OMPT组):细胞分别用LPA(1,10,25 μM)和OMPT(1,5,10μM)处理1h后,进行缺氧/复氧,复氧时不加LPA和OMPT.台盼蓝染色和细胞活性试剂盒检测细胞活力.流式细胞术检测凋亡细胞,Caspase-3/7活性检测试剂盒分析Caspase-3/7活性,免疫印迹检测凋亡相关蛋白包括裂解的Caspase-3,Bcl-2和Bax蛋白表达.结果:与对照组相比,H/R组的H9c2心肌细胞的活细胞数和细胞存活率均降低(P均＜0.05)；早期凋亡细胞数增加(P＜0.05).与H/R组相比,H/R+LPA组的心肌细胞活细胞数和细胞存活率增加(P均＜0.05),其中以10μM浓度的LPA作用最为明显.10 μM LPA也提高了原代乳鼠心肌细胞存活率(P＜0.05).H/R+LPA组两个浓度(LPA 1,10μM) H9c2心肌细胞的Caspase-3/7活性较H/R组显著降低(P＜0.05).同时,H/R+OMPT组三个浓度较H/R组都减少线粒体促凋亡Bax蛋白表达,增加了线粒体抗凋亡Bcl-2蛋白表达(P＜0.05或0.01).结论:LPA可能通过激活LPA3受体,抑制线粒体依赖的细胞凋亡途径,保护缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤,为心肌缺血再灌注损伤的防治提供了新的理论依据.
목적:탐토용혈린지산(LPA)대심기세포결양/복양유도손상적보호작용급궤제.방법:건립H9c2심기세포화원대유서심기세포결양/복양모형.실험분조:대조조:불주임하처리；결양/복양조(H/R조):무혈청배양적세포재결양관중결양24 h후,환함10％태우혈청적DMEM배양액재상양조건하배양3h;LPA예처리조(H/R+LPA조)화LPA3수체특이격동제(OMPT)예처리조(H/R+OMPT조):세포분별용LPA(1,10,25 μM)화OMPT(1,5,10μM)처리1h후,진행결양/복양,복양시불가LPA화OMPT.태반람염색화세포활성시제합검측세포활력.류식세포술검측조망세포,Caspase-3/7활성검측시제합분석Caspase-3/7활성,면역인적검측조망상관단백포괄렬해적Caspase-3,Bcl-2화Bax단백표체.결과:여대조조상비,H/R조적H9c2심기세포적활세포수화세포존활솔균강저(P균＜0.05)；조기조망세포수증가(P＜0.05).여H/R조상비,H/R+LPA조적심기세포활세포수화세포존활솔증가(P균＜0.05),기중이10μM농도적LPA작용최위명현.10 μM LPA야제고료원대유서심기세포존활솔(P＜0.05).H/R+LPA조량개농도(LPA 1,10μM) H9c2심기세포적Caspase-3/7활성교H/R조현저강저(P＜0.05).동시,H/R+OMPT조삼개농도교H/R조도감소선립체촉조망Bax단백표체,증가료선립체항조망Bcl-2단백표체(P＜0.05혹0.01).결론:LPA가능통과격활LPA3수체,억제선립체의뢰적세포조망도경,보호결양/복양유도적심기세포손상,위심기결혈재관주손상적방치제공료신적이론의거.