解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2013年
3期
345-348
,共4页
砷%亚砷酸钠%糖尿病%胰岛β细胞%Nrf2%Ⅱ相解毒酶%免疫印迹法%小鼠
砷%亞砷痠鈉%糖尿病%胰島β細胞%Nrf2%Ⅱ相解毒酶%免疫印跡法%小鼠
신%아신산납%당뇨병%이도β세포%Nrf2%Ⅱ상해독매%면역인적법%소서
Arsenic%Sodium arsenite%Diabetes%Pancreatic β-cell%Nrf2%Phase Ⅱ detoxification enzyme%Western blotting%Mouse
目的 检测急性亚砷酸钠作用小鼠胰岛β细胞的Nrf2及其调控的Ⅱ相解毒酶的表达情况.方法 4μmol/L亚砷酸钠(NaAsO2)作用于MIN6细胞2、6、12、18、24h;利用Western blotting检测亚砷酸钠暴露不同时间点细胞核、细胞质和细胞总的Nrf2蛋白表达;应用Real-time PCR检测不同时间点Nrf2及其调控的Ⅱ相解毒酶NAD(P)H:醌氧化还原酶1(Nqo1)和血红素氧化酶1(Hmox-1)mRNA表达.结果 亚砷酸钠暴露2h,Nrf2蛋白表达增多并达到高峰,之后随时间的延长Nrf2蛋白表达逐渐降低.Nrf2核蛋白表达的时间效应性与细胞总的Nrf2表达完全一致.但不同时间点的亚砷酸钠暴露对Nrf2的mRNA表达未出现显著影响.Nqo1和Hmox-1表达亦存在时间效应性,即亚砷酸钠暴露后2h,Nqo1和Hmox-1 mRNA表达开始增高,6h达到高峰,随后逐渐下降.结论 急性亚砷酸钠暴露后,能够诱导小鼠胰岛β细胞内Nrf2的蛋白表达,并促进其转位进入细胞核,调节其下游Ⅱ相解毒酶Nqo1和Hmox-1的转录活性.
目的 檢測急性亞砷痠鈉作用小鼠胰島β細胞的Nrf2及其調控的Ⅱ相解毒酶的錶達情況.方法 4μmol/L亞砷痠鈉(NaAsO2)作用于MIN6細胞2、6、12、18、24h;利用Western blotting檢測亞砷痠鈉暴露不同時間點細胞覈、細胞質和細胞總的Nrf2蛋白錶達;應用Real-time PCR檢測不同時間點Nrf2及其調控的Ⅱ相解毒酶NAD(P)H:醌氧化還原酶1(Nqo1)和血紅素氧化酶1(Hmox-1)mRNA錶達.結果 亞砷痠鈉暴露2h,Nrf2蛋白錶達增多併達到高峰,之後隨時間的延長Nrf2蛋白錶達逐漸降低.Nrf2覈蛋白錶達的時間效應性與細胞總的Nrf2錶達完全一緻.但不同時間點的亞砷痠鈉暴露對Nrf2的mRNA錶達未齣現顯著影響.Nqo1和Hmox-1錶達亦存在時間效應性,即亞砷痠鈉暴露後2h,Nqo1和Hmox-1 mRNA錶達開始增高,6h達到高峰,隨後逐漸下降.結論 急性亞砷痠鈉暴露後,能夠誘導小鼠胰島β細胞內Nrf2的蛋白錶達,併促進其轉位進入細胞覈,調節其下遊Ⅱ相解毒酶Nqo1和Hmox-1的轉錄活性.
목적 검측급성아신산납작용소서이도β세포적Nrf2급기조공적Ⅱ상해독매적표체정황.방법 4μmol/L아신산납(NaAsO2)작용우MIN6세포2、6、12、18、24h;이용Western blotting검측아신산납폭로불동시간점세포핵、세포질화세포총적Nrf2단백표체;응용Real-time PCR검측불동시간점Nrf2급기조공적Ⅱ상해독매NAD(P)H:곤양화환원매1(Nqo1)화혈홍소양화매1(Hmox-1)mRNA표체.결과 아신산납폭로2h,Nrf2단백표체증다병체도고봉,지후수시간적연장Nrf2단백표체축점강저.Nrf2핵단백표체적시간효응성여세포총적Nrf2표체완전일치.단불동시간점적아신산납폭로대Nrf2적mRNA표체미출현현저영향.Nqo1화Hmox-1표체역존재시간효응성,즉아신산납폭로후2h,Nqo1화Hmox-1 mRNA표체개시증고,6h체도고봉,수후축점하강.결론 급성아신산납폭로후,능구유도소서이도β세포내Nrf2적단백표체,병촉진기전위진입세포핵,조절기하유Ⅱ상해독매Nqo1화Hmox-1적전록활성.