解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2013年
3期
324-329
,共6页
林清%张更%邱荣晖%王玮
林清%張更%邱榮暉%王瑋
림청%장경%구영휘%왕위
膜铁转运蛋白1%缺氧缺血%实时定量-聚合酶链反应%免疫印迹法%O-2A祖细胞
膜鐵轉運蛋白1%缺氧缺血%實時定量-聚閤酶鏈反應%免疫印跡法%O-2A祖細胞
막철전운단백1%결양결혈%실시정량-취합매련반응%면역인적법%O-2A조세포
Ferroportin 1%Hypoxia-ischemia%Real-time PCR%Western blotting%Oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell
目的 观察膜铁转运蛋白1(FPNl)在O-2A祖细胞缺氧缺血损伤后的表达变化,探讨其在O-2A祖细胞缺氧缺血损伤中的作用.方法 体外培养O-2A祖细胞,以特异性抗体A2B5鉴定,观察FPN1在O-2A祖细胞上的定位表达；以糖氧剥夺(OGD)法建立缺氧缺血细胞模型,CCK8法检测细胞存活率；应用免疫荧光染色法、实时荧光定量PCR法和Western blotting法观察FPN1在细胞缺氧缺血后的表达变化.结果 FPN1定位表达于O-2A祖细胞的细胞膜、细胞质和突起；OGD3h、6h、12h及24h细胞存活率呈时间依赖性降低(P＜ 0.05);OGD12h内细胞FPN1免疫荧光强度进行性减弱；与OGD0h相比,FPN1 mRNA和蛋白水平在OGD3h表达下调,OGD6h进一步降低,OGD12h最低,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 O-2A祖细胞缺氧缺血损伤后FPN1表达明显下调,细胞存活率显著降低,提示FPN1可能参与O-2A祖细胞的缺氧缺血损伤过程.
目的 觀察膜鐵轉運蛋白1(FPNl)在O-2A祖細胞缺氧缺血損傷後的錶達變化,探討其在O-2A祖細胞缺氧缺血損傷中的作用.方法 體外培養O-2A祖細胞,以特異性抗體A2B5鑒定,觀察FPN1在O-2A祖細胞上的定位錶達；以糖氧剝奪(OGD)法建立缺氧缺血細胞模型,CCK8法檢測細胞存活率；應用免疫熒光染色法、實時熒光定量PCR法和Western blotting法觀察FPN1在細胞缺氧缺血後的錶達變化.結果 FPN1定位錶達于O-2A祖細胞的細胞膜、細胞質和突起；OGD3h、6h、12h及24h細胞存活率呈時間依賴性降低(P＜ 0.05);OGD12h內細胞FPN1免疫熒光彊度進行性減弱；與OGD0h相比,FPN1 mRNA和蛋白水平在OGD3h錶達下調,OGD6h進一步降低,OGD12h最低,差異具有統計學意義(P＜0.05).結論 O-2A祖細胞缺氧缺血損傷後FPN1錶達明顯下調,細胞存活率顯著降低,提示FPN1可能參與O-2A祖細胞的缺氧缺血損傷過程.
목적 관찰막철전운단백1(FPNl)재O-2A조세포결양결혈손상후적표체변화,탐토기재O-2A조세포결양결혈손상중적작용.방법 체외배양O-2A조세포,이특이성항체A2B5감정,관찰FPN1재O-2A조세포상적정위표체；이당양박탈(OGD)법건립결양결혈세포모형,CCK8법검측세포존활솔；응용면역형광염색법、실시형광정량PCR법화Western blotting법관찰FPN1재세포결양결혈후적표체변화.결과 FPN1정위표체우O-2A조세포적세포막、세포질화돌기；OGD3h、6h、12h급24h세포존활솔정시간의뢰성강저(P＜ 0.05);OGD12h내세포FPN1면역형광강도진행성감약；여OGD0h상비,FPN1 mRNA화단백수평재OGD3h표체하조,OGD6h진일보강저,OGD12h최저,차이구유통계학의의(P＜0.05).결론 O-2A조세포결양결혈손상후FPN1표체명현하조,세포존활솔현저강저,제시FPN1가능삼여O-2A조세포적결양결혈손상과정.
