中西医结合肝病杂志
中西醫結閤肝病雜誌
중서의결합간병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE ON LIVER DISEASES
2013年
4期
222-224,250
,共4页
刘小美%方肇勤%吴中华%梁超
劉小美%方肇勤%吳中華%樑超
류소미%방조근%오중화%량초
邪毒证%肝癌%垂体%促肾上腺皮质激素释放激素%促肾上腺皮质激素%小鼠
邪毒證%肝癌%垂體%促腎上腺皮質激素釋放激素%促腎上腺皮質激素%小鼠
사독증%간암%수체%촉신상선피질격소석방격소%촉신상선피질격소%소서
pathogenic toxin syndrome%liver cancer%pituitary%corticotropin releasing hormone%adrenocorticotropic hormone%mice
目的:在以往动物实验发现邪毒证肝癌小鼠下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)和垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)前体阿黑皮素原(Pome)表达均降低,而血液ACTH表达异常升高且伴随昼夜节律通路和蛋白激酶A (PKA)通路均较活跃；这种情况推测与邪毒证肝癌小鼠垂体Pomc与ACTH并不同步发生变化,而其ACTH的异常升高可能与CRH释放频率增加有关,PKA通路参与介导此过程.鉴此,本项目在体外观察CRH释放频率改变对垂体细胞ACTH分泌和Pomc表达的影响,以及PKA通路在此过程中的作用,以探索CRH致邪毒证肝癌小鼠垂体ACTH调控异常的部分机制.方法:体外培养特异性分泌ACTH的小鼠垂体瘤细胞株AtT20,①分别观察0nM、25nM、50nM、100nM、200nM、400nM的CRH刺激细胞15分钟、30分钟、60分钟和90分钟后ACTH含量和Pomc表达的变化,发现25nM的CRH刺激60分钟时ACTH含量最高,而Pomc是在400nM的CRH刺激15分钟时表达最高；②在60分钟内,以CRH刺激细胞1～5次,每次均为25nM,发现使ACTH含量和Pomc表达最高的刺激次数分别为2次和3次；③往细胞中预先加入30μM的PKA抑制剂H89,30分钟和60分钟时各加入25nM的CRH刺激细胞,90分钟时检测细胞ACTH含量和Pomc的表达.结果:PKA被抑制后,细胞ACTH含量明显低于未被抑制者,但仍高于空白对照组；而给予CRH刺激后细胞的Pome表达均降低,以给予H89者更甚.结论:邪毒证肝癌小鼠ACTH异常升高可能与CRH的释放频率增加有关,而PKA通路介导了这一过程,但其并不是介导此功能的唯一通路.
目的:在以往動物實驗髮現邪毒證肝癌小鼠下丘腦促腎上腺皮質激素釋放激素(CRH)和垂體促腎上腺皮質激素(ACTH)前體阿黑皮素原(Pome)錶達均降低,而血液ACTH錶達異常升高且伴隨晝夜節律通路和蛋白激酶A (PKA)通路均較活躍；這種情況推測與邪毒證肝癌小鼠垂體Pomc與ACTH併不同步髮生變化,而其ACTH的異常升高可能與CRH釋放頻率增加有關,PKA通路參與介導此過程.鑒此,本項目在體外觀察CRH釋放頻率改變對垂體細胞ACTH分泌和Pomc錶達的影響,以及PKA通路在此過程中的作用,以探索CRH緻邪毒證肝癌小鼠垂體ACTH調控異常的部分機製.方法:體外培養特異性分泌ACTH的小鼠垂體瘤細胞株AtT20,①分彆觀察0nM、25nM、50nM、100nM、200nM、400nM的CRH刺激細胞15分鐘、30分鐘、60分鐘和90分鐘後ACTH含量和Pomc錶達的變化,髮現25nM的CRH刺激60分鐘時ACTH含量最高,而Pomc是在400nM的CRH刺激15分鐘時錶達最高；②在60分鐘內,以CRH刺激細胞1～5次,每次均為25nM,髮現使ACTH含量和Pomc錶達最高的刺激次數分彆為2次和3次；③往細胞中預先加入30μM的PKA抑製劑H89,30分鐘和60分鐘時各加入25nM的CRH刺激細胞,90分鐘時檢測細胞ACTH含量和Pomc的錶達.結果:PKA被抑製後,細胞ACTH含量明顯低于未被抑製者,但仍高于空白對照組；而給予CRH刺激後細胞的Pome錶達均降低,以給予H89者更甚.結論:邪毒證肝癌小鼠ACTH異常升高可能與CRH的釋放頻率增加有關,而PKA通路介導瞭這一過程,但其併不是介導此功能的唯一通路.
목적:재이왕동물실험발현사독증간암소서하구뇌촉신상선피질격소석방격소(CRH)화수체촉신상선피질격소(ACTH)전체아흑피소원(Pome)표체균강저,이혈액ACTH표체이상승고차반수주야절률통로화단백격매A (PKA)통로균교활약；저충정황추측여사독증간암소서수체Pomc여ACTH병불동보발생변화,이기ACTH적이상승고가능여CRH석방빈솔증가유관,PKA통로삼여개도차과정.감차,본항목재체외관찰CRH석방빈솔개변대수체세포ACTH분비화Pomc표체적영향,이급PKA통로재차과정중적작용,이탐색CRH치사독증간암소서수체ACTH조공이상적부분궤제.방법:체외배양특이성분비ACTH적소서수체류세포주AtT20,①분별관찰0nM、25nM、50nM、100nM、200nM、400nM적CRH자격세포15분종、30분종、60분종화90분종후ACTH함량화Pomc표체적변화,발현25nM적CRH자격60분종시ACTH함량최고,이Pomc시재400nM적CRH자격15분종시표체최고；②재60분종내,이CRH자격세포1～5차,매차균위25nM,발현사ACTH함량화Pomc표체최고적자격차수분별위2차화3차；③왕세포중예선가입30μM적PKA억제제H89,30분종화60분종시각가입25nM적CRH자격세포,90분종시검측세포ACTH함량화Pomc적표체.결과:PKA피억제후,세포ACTH함량명현저우미피억제자,단잉고우공백대조조；이급여CRH자격후세포적Pome표체균강저,이급여H89자경심.결론:사독증간암소서ACTH이상승고가능여CRH적석방빈솔증가유관,이PKA통로개도료저일과정,단기병불시개도차공능적유일통로.
