西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2013年
4期
493-497
,共5页
姜美华%徐友平%姚国乾%韩志武%涂玲
薑美華%徐友平%姚國乾%韓誌武%塗玲
강미화%서우평%요국건%한지무%도령
心肌纤维化%缬沙坦%血管紧张素Ⅱ%转化生长因子β%结缔组织生长因子
心肌纖維化%纈沙坦%血管緊張素Ⅱ%轉化生長因子β%結締組織生長因子
심기섬유화%힐사탄%혈관긴장소Ⅱ%전화생장인자β%결체조직생장인자
目的 通过体外培养新生大鼠心肌成纤维细胞研究缬沙坦对转化生长因子β (transforming growth factorβ,TGF-β)和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响.方法 胶原酶消化法分离心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs),构建AngⅡ诱导CFs的心肌纤维化细胞模型.各观察点以不同浓度的缬沙坦干预模型,光镜下观察细胞生长状况.采用MTT比色法检测缬沙坦对CFs增殖的影响,AO/EB染色法分析CFs活力,电镜下研究亚细胞结构；采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定CFsTGF-β1及CTGF mRNA的表达.WesternBlot法测定TGF-β1、CTGF蛋白的表达.结果 光镜下可见:CFs于种植24h后完成贴壁,AngⅡ干预后的细胞显著增殖,不同浓度的缬沙坦处理后的细胞24h内均表现为凋亡.MTT及AO/EB染色表明缬沙坦浓度为10μmol/L干预8h抑制增殖效应最为显著.AO/EB染色及电镜结果提示其作用机制为诱导细胞凋亡.RT-PCR及Western Blot结果显示,上述条件下,CFs中TGF-β和CTGF表达明显下调.结论 缬沙坦浓度为10μmol /L作用8h后CFs凋亡率最高,其作用机制与TGF-β及CTGF的表达下调有关.
目的 通過體外培養新生大鼠心肌成纖維細胞研究纈沙坦對轉化生長因子β (transforming growth factorβ,TGF-β)和結締組織生長因子(connective tissue growth factor,CTGF)錶達的影響.方法 膠原酶消化法分離心肌成纖維細胞(cardiac fibroblasts,CFs),構建AngⅡ誘導CFs的心肌纖維化細胞模型.各觀察點以不同濃度的纈沙坦榦預模型,光鏡下觀察細胞生長狀況.採用MTT比色法檢測纈沙坦對CFs增殖的影響,AO/EB染色法分析CFs活力,電鏡下研究亞細胞結構；採用反轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)技術測定CFsTGF-β1及CTGF mRNA的錶達.WesternBlot法測定TGF-β1、CTGF蛋白的錶達.結果 光鏡下可見:CFs于種植24h後完成貼壁,AngⅡ榦預後的細胞顯著增殖,不同濃度的纈沙坦處理後的細胞24h內均錶現為凋亡.MTT及AO/EB染色錶明纈沙坦濃度為10μmol/L榦預8h抑製增殖效應最為顯著.AO/EB染色及電鏡結果提示其作用機製為誘導細胞凋亡.RT-PCR及Western Blot結果顯示,上述條件下,CFs中TGF-β和CTGF錶達明顯下調.結論 纈沙坦濃度為10μmol /L作用8h後CFs凋亡率最高,其作用機製與TGF-β及CTGF的錶達下調有關.
목적 통과체외배양신생대서심기성섬유세포연구힐사탄대전화생장인자β (transforming growth factorβ,TGF-β)화결체조직생장인자(connective tissue growth factor,CTGF)표체적영향.방법 효원매소화법분리심기성섬유세포(cardiac fibroblasts,CFs),구건AngⅡ유도CFs적심기섬유화세포모형.각관찰점이불동농도적힐사탄간예모형,광경하관찰세포생장상황.채용MTT비색법검측힐사탄대CFs증식적영향,AO/EB염색법분석CFs활력,전경하연구아세포결구；채용반전록취합매련반응(RT-PCR)기술측정CFsTGF-β1급CTGF mRNA적표체.WesternBlot법측정TGF-β1、CTGF단백적표체.결과 광경하가견:CFs우충식24h후완성첩벽,AngⅡ간예후적세포현저증식,불동농도적힐사탄처리후적세포24h내균표현위조망.MTT급AO/EB염색표명힐사탄농도위10μmol/L간예8h억제증식효응최위현저.AO/EB염색급전경결과제시기작용궤제위유도세포조망.RT-PCR급Western Blot결과현시,상술조건하,CFs중TGF-β화CTGF표체명현하조.결론 힐사탄농도위10μmol /L작용8h후CFs조망솔최고,기작용궤제여TGF-β급CTGF적표체하조유관.
