中国兽医杂志
中國獸醫雜誌
중국수의잡지
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY MEDICINE
2013年
5期
13-16
,共4页
袁颖烁%赵敬慧%宋菲菲%刘晔%张守峰%张乐萃%扈荣良
袁穎爍%趙敬慧%宋菲菲%劉曄%張守峰%張樂萃%扈榮良
원영삭%조경혜%송비비%류엽%장수봉%장악췌%호영량
狂犬病病毒%半套式RT-PCR%诊断
狂犬病病毒%半套式RT-PCR%診斷
광견병병독%반투식RT-PCR%진단
基于我国流行的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)均属基因Ⅰ型,本研究根据GenBank公布的31株RV N基因全序列,选取保守区域设计2对引物,建立了一种检测RV的半套式聚合酶链式反应(Semi-nested RT-PCR),并对引物的灵敏性、敏感性和特异性进行检测.将该方法检测的36份新鲜脑组织样品,与荧光抗体染色法(FAT)进行比较,并将PCR结果为阳性的新鲜样品室温下放置腐败后进行检测.结果显示,该方法灵敏度检测可达到0.01 TCID50/mL.对检测呈阳性的病料进行序列分析,全部为狂犬病病毒；检测犬细小病毒(CPV)、犬瘟热病毒(CDV)、犬腺病病毒(CAV)、伪狂犬病病毒(PRV)等非狂犬病病毒,结果均为阴性,表明该引物特异性较高.该方法与FAT检测结果完全一致,并能从腐败样品中检出RV,更适用于腐败样品的检测,具有快速、准确的特点,可广泛应用于广大基层狂犬病的诊断及试验研究.
基于我國流行的狂犬病病毒(Rabies Virus,RV)均屬基因Ⅰ型,本研究根據GenBank公佈的31株RV N基因全序列,選取保守區域設計2對引物,建立瞭一種檢測RV的半套式聚閤酶鏈式反應(Semi-nested RT-PCR),併對引物的靈敏性、敏感性和特異性進行檢測.將該方法檢測的36份新鮮腦組織樣品,與熒光抗體染色法(FAT)進行比較,併將PCR結果為暘性的新鮮樣品室溫下放置腐敗後進行檢測.結果顯示,該方法靈敏度檢測可達到0.01 TCID50/mL.對檢測呈暘性的病料進行序列分析,全部為狂犬病病毒；檢測犬細小病毒(CPV)、犬瘟熱病毒(CDV)、犬腺病病毒(CAV)、偽狂犬病病毒(PRV)等非狂犬病病毒,結果均為陰性,錶明該引物特異性較高.該方法與FAT檢測結果完全一緻,併能從腐敗樣品中檢齣RV,更適用于腐敗樣品的檢測,具有快速、準確的特點,可廣汎應用于廣大基層狂犬病的診斷及試驗研究.
기우아국류행적광견병병독(Rabies Virus,RV)균속기인Ⅰ형,본연구근거GenBank공포적31주RV N기인전서렬,선취보수구역설계2대인물,건립료일충검측RV적반투식취합매련식반응(Semi-nested RT-PCR),병대인물적령민성、민감성화특이성진행검측.장해방법검측적36빈신선뇌조직양품,여형광항체염색법(FAT)진행비교,병장PCR결과위양성적신선양품실온하방치부패후진행검측.결과현시,해방법령민도검측가체도0.01 TCID50/mL.대검측정양성적병료진행서렬분석,전부위광견병병독；검측견세소병독(CPV)、견온열병독(CDV)、견선병병독(CAV)、위광견병병독(PRV)등비광견병병독,결과균위음성,표명해인물특이성교고.해방법여FAT검측결과완전일치,병능종부패양품중검출RV,경괄용우부패양품적검측,구유쾌속、준학적특점,가엄범응용우엄대기층광견병적진단급시험연구.
