湖南大学学报（自然科学版）
湖南大學學報（自然科學版）
호남대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HUNAN UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES EDITION)
2013年
6期
92-95
,共4页
廖红东%陆剑%刘选明%王磊%朱咏华
廖紅東%陸劍%劉選明%王磊%硃詠華
료홍동%륙검%류선명%왕뢰%주영화
突变%倾向错误PCR%锰离子%DNA片段
突變%傾嚮錯誤PCR%錳離子%DNA片段
돌변%경향착오PCR%맹리자%DNA편단
mutagenesis%error-prone PCR%manganese%DNA fragment
针对倾向错误的PCR技术中不同目的、不同长度基因的诱变种类一直缺乏准确参考的问题,以酵母spt15基因为研究对象,在标准的PCR反应体系中加入不同Mn2+摩尔浓度(0.125,0.250和0.500 mmol·L-1)进行倾向错误的PCR,扩增spt15不同长度(分别约为200,500和700 bp)的DNA片段,研究其突变频率,突变碱基数目及突变类型,以分析不同种类的突变所需的最佳条件.研究结果表明:长片段DNA的PCR突变率对Mn2+摩尔浓度更敏感;模板的长度对DNA PCR突变碱基个数也有较为明显的影响,低Mn2+摩尔浓度有利于单突变;Mn2+驱动的突变有明显的倾向性,其中A→G和T→C的突变居多.
針對傾嚮錯誤的PCR技術中不同目的、不同長度基因的誘變種類一直缺乏準確參攷的問題,以酵母spt15基因為研究對象,在標準的PCR反應體繫中加入不同Mn2+摩爾濃度(0.125,0.250和0.500 mmol·L-1)進行傾嚮錯誤的PCR,擴增spt15不同長度(分彆約為200,500和700 bp)的DNA片段,研究其突變頻率,突變堿基數目及突變類型,以分析不同種類的突變所需的最佳條件.研究結果錶明:長片段DNA的PCR突變率對Mn2+摩爾濃度更敏感;模闆的長度對DNA PCR突變堿基箇數也有較為明顯的影響,低Mn2+摩爾濃度有利于單突變;Mn2+驅動的突變有明顯的傾嚮性,其中A→G和T→C的突變居多.
침대경향착오적PCR기술중불동목적、불동장도기인적유변충류일직결핍준학삼고적문제,이효모spt15기인위연구대상,재표준적PCR반응체계중가입불동Mn2+마이농도(0.125,0.250화0.500 mmol·L-1)진행경향착오적PCR,확증spt15불동장도(분별약위200,500화700 bp)적DNA편단,연구기돌변빈솔,돌변감기수목급돌변류형,이분석불동충류적돌변소수적최가조건.연구결과표명:장편단DNA적PCR돌변솔대Mn2+마이농도경민감;모판적장도대DNA PCR돌변감기개수야유교위명현적영향,저Mn2+마이농도유리우단돌변;Mn2+구동적돌변유명현적경향성,기중A→G화T→C적돌변거다.
