华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2013年
4期
386-390
,共5页
马东霞%赵越%向莹%刘斌
馬東霞%趙越%嚮瑩%劉斌
마동하%조월%향형%류빈
树突状细胞%诱导%鉴定
樹突狀細胞%誘導%鑒定
수돌상세포%유도%감정
目的 体外诱导扩增获取大量高纯度的小鼠骨髓来源树突状细胞(DC),并研究不同生长状态的DC成熟情况及进行生物学特性鉴定.方法 以重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重组小鼠白细胞介素-4 (rmIL-4),体外诱导小鼠骨髓细胞分化为DC,脂多糖(LPS)刺激24 h,倒置显微镜动态观察细胞形态学变化,并分别收集悬浮细胞、贴壁细胞,流式细胞术(FACS)分析 DC细胞表面分子CD11c、MHCⅡ类分子、CD80和CD86的表达水平,并应用混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激异基因淋巴细胞增殖的能力.结果 经体外诱导培养第3天即可见大量细胞集落形成;培养至第9天,细胞形态不规则,具有典型DC形态.同组悬浮DC表面MHCⅡ类分子和共刺激分子CD80、CD86的表达水平高于贴壁DC.LPS刺激24 h后,DC表面MHCⅡ类分子、CD80、CD86的表达水平显著升高,同时可以显著刺激同种异基因淋巴细胞增殖.结论 体外简易诱导培养可以获得高纯度小鼠骨髓来源的各具特性的DC,为开展DC的相关实验研究提供大量稳定的细胞来源.
目的 體外誘導擴增穫取大量高純度的小鼠骨髓來源樹突狀細胞(DC),併研究不同生長狀態的DC成熟情況及進行生物學特性鑒定.方法 以重組小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(rmGM-CSF)和重組小鼠白細胞介素-4 (rmIL-4),體外誘導小鼠骨髓細胞分化為DC,脂多糖(LPS)刺激24 h,倒置顯微鏡動態觀察細胞形態學變化,併分彆收集懸浮細胞、貼壁細胞,流式細胞術(FACS)分析 DC細胞錶麵分子CD11c、MHCⅡ類分子、CD80和CD86的錶達水平,併應用混閤淋巴細胞反應(MLR)檢測其刺激異基因淋巴細胞增殖的能力.結果 經體外誘導培養第3天即可見大量細胞集落形成;培養至第9天,細胞形態不規則,具有典型DC形態.同組懸浮DC錶麵MHCⅡ類分子和共刺激分子CD80、CD86的錶達水平高于貼壁DC.LPS刺激24 h後,DC錶麵MHCⅡ類分子、CD80、CD86的錶達水平顯著升高,同時可以顯著刺激同種異基因淋巴細胞增殖.結論 體外簡易誘導培養可以穫得高純度小鼠骨髓來源的各具特性的DC,為開展DC的相關實驗研究提供大量穩定的細胞來源.
목적 체외유도확증획취대량고순도적소서골수래원수돌상세포(DC),병연구불동생장상태적DC성숙정황급진행생물학특성감정.방법 이중조소서립세포거서세포집락자격인자(rmGM-CSF)화중조소서백세포개소-4 (rmIL-4),체외유도소서골수세포분화위DC,지다당(LPS)자격24 h,도치현미경동태관찰세포형태학변화,병분별수집현부세포、첩벽세포,류식세포술(FACS)분석 DC세포표면분자CD11c、MHCⅡ류분자、CD80화CD86적표체수평,병응용혼합림파세포반응(MLR)검측기자격이기인림파세포증식적능력.결과 경체외유도배양제3천즉가견대량세포집락형성;배양지제9천,세포형태불규칙,구유전형DC형태.동조현부DC표면MHCⅡ류분자화공자격분자CD80、CD86적표체수평고우첩벽DC.LPS자격24 h후,DC표면MHCⅡ류분자、CD80、CD86적표체수평현저승고,동시가이현저자격동충이기인림파세포증식.결론 체외간역유도배양가이획득고순도소서골수래원적각구특성적DC,위개전DC적상관실험연구제공대량은정적세포래원.
