军事医学
軍事醫學
군사의학
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2013年
7期
509-513
,共5页
顾晶%李平%张部昌%刘萱%曹诚
顧晶%李平%張部昌%劉萱%曹誠
고정%리평%장부창%류훤%조성
中间丝%细胞角蛋白%细胞骨架%氧化应激%细胞凋亡
中間絲%細胞角蛋白%細胞骨架%氧化應激%細胞凋亡
중간사%세포각단백%세포골가%양화응격%세포조망
目的 研究氧化应激条件下中间纤维蛋白细胞角蛋白(cytokeratin)的抗凋亡作用.方法 利用RNA干扰(RNAi)技术敲低细胞内细胞角蛋白18(CK18)的表达,免疫印迹法检测细胞角蛋白的表达水平,并通过A549细胞建立细胞角蛋白敲低稳定细胞系.利用免疫荧光染色技术观察细胞角蛋白对细胞骨架的影响.利用流式细胞技术检测细胞角蛋白对细胞内ROS(reactive oxygen species)水平及氧化应激诱导细胞凋亡的影响.结果 筛选获得3个干扰效果较好的RNAi序列,成功利用A549细胞建立细胞角蛋白敲低的稳定细胞系(A549-KD).CK18表达敲低导致细胞内多种细胞角蛋白表达广泛下调,并破坏细胞微丝及微管骨架结构.氧化应激条件下A549-KD细胞抗凋亡活性显著降低.结论 细胞角蛋白参与维持细胞骨架结构,对抗ROS诱导的细胞凋亡,提示其在细胞的氧化应激过程中发挥保护作用.
目的 研究氧化應激條件下中間纖維蛋白細胞角蛋白(cytokeratin)的抗凋亡作用.方法 利用RNA榦擾(RNAi)技術敲低細胞內細胞角蛋白18(CK18)的錶達,免疫印跡法檢測細胞角蛋白的錶達水平,併通過A549細胞建立細胞角蛋白敲低穩定細胞繫.利用免疫熒光染色技術觀察細胞角蛋白對細胞骨架的影響.利用流式細胞技術檢測細胞角蛋白對細胞內ROS(reactive oxygen species)水平及氧化應激誘導細胞凋亡的影響.結果 篩選穫得3箇榦擾效果較好的RNAi序列,成功利用A549細胞建立細胞角蛋白敲低的穩定細胞繫(A549-KD).CK18錶達敲低導緻細胞內多種細胞角蛋白錶達廣汎下調,併破壞細胞微絲及微管骨架結構.氧化應激條件下A549-KD細胞抗凋亡活性顯著降低.結論 細胞角蛋白參與維持細胞骨架結構,對抗ROS誘導的細胞凋亡,提示其在細胞的氧化應激過程中髮揮保護作用.
목적 연구양화응격조건하중간섬유단백세포각단백(cytokeratin)적항조망작용.방법 이용RNA간우(RNAi)기술고저세포내세포각단백18(CK18)적표체,면역인적법검측세포각단백적표체수평,병통과A549세포건립세포각단백고저은정세포계.이용면역형광염색기술관찰세포각단백대세포골가적영향.이용류식세포기술검측세포각단백대세포내ROS(reactive oxygen species)수평급양화응격유도세포조망적영향.결과 사선획득3개간우효과교호적RNAi서렬,성공이용A549세포건립세포각단백고저적은정세포계(A549-KD).CK18표체고저도치세포내다충세포각단백표체엄범하조,병파배세포미사급미관골가결구.양화응격조건하A549-KD세포항조망활성현저강저.결론 세포각단백삼여유지세포골가결구,대항ROS유도적세포조망,제시기재세포적양화응격과정중발휘보호작용.
