宁夏医学杂志
寧夏醫學雜誌
저하의학잡지
NINGXIA MEDICAL JOURNAL
2014年
3期
193-195,前插1
,共4页
周期素依赖性蛋白激酶-5%p35%足细胞%siRNA%Cdk5活性
週期素依賴性蛋白激酶-5%p35%足細胞%siRNA%Cdk5活性
주기소의뢰성단백격매-5%p35%족세포%siRNA%Cdk5활성
Cdk5%p35%Sertoli cell%Sirna%Cdk5 activity
目的 研究周期素依赖性蛋白激酶-5(Cdk5)及其激活剂p35在肾小球足细胞中的表达及作用.方法 分别培养原代小鼠神经细胞、原代小鼠分化成熟的离体足细胞(简称足细胞)以及人胚肾细胞(HEK293细胞),应用免疫印迹、免疫沉淀及同位素标记等方法检测Cdk5、p35的表达及Cdk5的活性;以原代小鼠分化成熟的离体足细胞为研究对象,分为正常组、ROS组(Cdk5活性抑制组)、Cdk5 siRNA组(Cdk5表达沉默组),观察Cdk5的表达及活性,并应用Cdk5 siRNA、Cdk5化学抑制剂-Roscovitine进行抑制实验.结果 离体培养原代小鼠分化成熟的足细胞中均有Cdk5及p35蛋白的表达;Cdk5在足细胞中具有活性;沉默Cdk5表达、应用Cdk5活性抑制剂Roscovitine抑制Cdk5活性后,可引起足细胞特异性标志物WT1的表达减少,说明足细胞受到损伤,数量减少.结论 Cdk5的表达及活性在维持正常足细胞功能中起重要作用.
目的 研究週期素依賴性蛋白激酶-5(Cdk5)及其激活劑p35在腎小毬足細胞中的錶達及作用.方法 分彆培養原代小鼠神經細胞、原代小鼠分化成熟的離體足細胞(簡稱足細胞)以及人胚腎細胞(HEK293細胞),應用免疫印跡、免疫沉澱及同位素標記等方法檢測Cdk5、p35的錶達及Cdk5的活性;以原代小鼠分化成熟的離體足細胞為研究對象,分為正常組、ROS組(Cdk5活性抑製組)、Cdk5 siRNA組(Cdk5錶達沉默組),觀察Cdk5的錶達及活性,併應用Cdk5 siRNA、Cdk5化學抑製劑-Roscovitine進行抑製實驗.結果 離體培養原代小鼠分化成熟的足細胞中均有Cdk5及p35蛋白的錶達;Cdk5在足細胞中具有活性;沉默Cdk5錶達、應用Cdk5活性抑製劑Roscovitine抑製Cdk5活性後,可引起足細胞特異性標誌物WT1的錶達減少,說明足細胞受到損傷,數量減少.結論 Cdk5的錶達及活性在維持正常足細胞功能中起重要作用.
목적 연구주기소의뢰성단백격매-5(Cdk5)급기격활제p35재신소구족세포중적표체급작용.방법 분별배양원대소서신경세포、원대소서분화성숙적리체족세포(간칭족세포)이급인배신세포(HEK293세포),응용면역인적、면역침정급동위소표기등방법검측Cdk5、p35적표체급Cdk5적활성;이원대소서분화성숙적리체족세포위연구대상,분위정상조、ROS조(Cdk5활성억제조)、Cdk5 siRNA조(Cdk5표체침묵조),관찰Cdk5적표체급활성,병응용Cdk5 siRNA、Cdk5화학억제제-Roscovitine진행억제실험.결과 리체배양원대소서분화성숙적족세포중균유Cdk5급p35단백적표체;Cdk5재족세포중구유활성;침묵Cdk5표체、응용Cdk5활성억제제Roscovitine억제Cdk5활성후,가인기족세포특이성표지물WT1적표체감소,설명족세포수도손상,수량감소.결론 Cdk5적표체급활성재유지정상족세포공능중기중요작용.
