东北农业大学学报
東北農業大學學報
동북농업대학학보
JOURNAL OF NORTHEAST AGRICULTURAL UNIVERSITY
2013年
5期
18-23
,共6页
张颖%梁海晶%马广鹏%姜昭%王志刚%南超%王溪%葛世杰
張穎%樑海晶%馬廣鵬%薑昭%王誌剛%南超%王溪%葛世傑
장영%량해정%마엄붕%강소%왕지강%남초%왕계%갈세걸
羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶%羟基阿特拉津%蛋白纯化%酶学性质
羥基阿特拉津脫乙胺基水解酶%羥基阿特拉津%蛋白純化%酶學性質
간기아특랍진탈을알기수해매%간기아특랍진%단백순화%매학성질
hydroxyatrazine N-ethylaminohydrolase%hydroxyatrazine%protein purification%enzymatic properties
采用Ni-NTA亲和层析法对基因重组菌中的羟基阿特拉津脱乙胺基水解酶(AtzB)进行分离纯化,并对该酶的典型酶学性质进行研究.纯化处理后,AtzB的纯度提高15倍,酶活回收率高达15.2％.酶学性质研究表明,AtzB的最适反应温度为40℃;最适反应pH为9.0.在最适反应条件下,AtzB对底物最大反应速率Vmax为3.17μmol·L-1·min-1,米氏常数Km为0.45 mmol·L-1.反应缓冲液中Cu(Ⅱ)对酶活力有相对较强的抑制作用(P＜0.05),Zn(Ⅱ)对酶活力影响相对较小(P＜0.05),而Co(Ⅱ)、Cr(Ⅲ)、Ca(Ⅱ)和Ni(Ⅱ)则对酶活力基本没有影响.盐度对AtzB活力影响较大,当缓冲液中NaCl浓度达到1 mol·L-1时,AtzB完全失活.
採用Ni-NTA親和層析法對基因重組菌中的羥基阿特拉津脫乙胺基水解酶(AtzB)進行分離純化,併對該酶的典型酶學性質進行研究.純化處理後,AtzB的純度提高15倍,酶活迴收率高達15.2％.酶學性質研究錶明,AtzB的最適反應溫度為40℃;最適反應pH為9.0.在最適反應條件下,AtzB對底物最大反應速率Vmax為3.17μmol·L-1·min-1,米氏常數Km為0.45 mmol·L-1.反應緩遲液中Cu(Ⅱ)對酶活力有相對較彊的抑製作用(P＜0.05),Zn(Ⅱ)對酶活力影響相對較小(P＜0.05),而Co(Ⅱ)、Cr(Ⅲ)、Ca(Ⅱ)和Ni(Ⅱ)則對酶活力基本沒有影響.鹽度對AtzB活力影響較大,噹緩遲液中NaCl濃度達到1 mol·L-1時,AtzB完全失活.
채용Ni-NTA친화층석법대기인중조균중적간기아특랍진탈을알기수해매(AtzB)진행분리순화,병대해매적전형매학성질진행연구.순화처리후,AtzB적순도제고15배,매활회수솔고체15.2％.매학성질연구표명,AtzB적최괄반응온도위40℃;최괄반응pH위9.0.재최괄반응조건하,AtzB대저물최대반응속솔Vmax위3.17μmol·L-1·min-1,미씨상수Km위0.45 mmol·L-1.반응완충액중Cu(Ⅱ)대매활력유상대교강적억제작용(P＜0.05),Zn(Ⅱ)대매활력영향상대교소(P＜0.05),이Co(Ⅱ)、Cr(Ⅲ)、Ca(Ⅱ)화Ni(Ⅱ)칙대매활력기본몰유영향.염도대AtzB활력영향교대,당완충액중NaCl농도체도1 mol·L-1시,AtzB완전실활.
