浙江大学学报（农业与生命科学版）
浙江大學學報（農業與生命科學版）
절강대학학보（농업여생명과학판）
JOURNAL OF ZHEJIANG UNIVERSITY(AGRICULTURE & LIFE SCIENCES)
2013年
4期
360-368
,共9页
王亚%刘建平%徐梦云%季为捷%凃巨民%张晓波
王亞%劉建平%徐夢雲%季為捷%凃巨民%張曉波
왕아%류건평%서몽운%계위첩%도거민%장효파
水稻%亚细胞定位%泛素缀合酶样蛋白基因%胁迫处理
水稻%亞細胞定位%汎素綴閤酶樣蛋白基因%脅迫處理
수도%아세포정위%범소철합매양단백기인%협박처리
Oryza sativa L.%subcellular localization%ubiquitin-conjugating enzyme-like gene (OsCROC-1A)%stress treatment
为研究水稻泛素缀合酶样蛋白的序列特征、基因表达模式及亚细胞定位模式,采用逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),从水稻日本晴中鉴定并分离到1个泛素缀合酶样蛋白基因即OsCROC-1A的开放阅读框.序列分析结果表明,该基因编码1个具有146个氨基酸的蛋白质,含UBC保守功能域和催化位点D.比对分析结果表明,OsCROC-1A蛋白与其他CROC-1蛋白之间具有很高的相似性(42.61％～84.14％).聚类分析结果也显示出良好的物种属性.实时荧光定量PCR分析结果表明,OsCROC-1A在水稻各组织中均有表达,其中,在叶片、根、外稃中的表达量相对较高,在内稃、茎、雌蕊、愈伤组织中的表达量次之,而在雄蕊中的表达量相对最低.经4℃低温、20 mmol/L H2O2、0.01％甲基磺酸甲酯等胁迫处理使胚性愈伤中的OsCROC-1A表达量显著上调,经300 mmol/L甘露醇、100 μmol/L脱落酸、200 mmol/L NaC1胁迫处理则使愈伤组织中的OsCROC-1A表达量降低.OsCROC-1A与EGFP的融合蛋白表达于细胞质及细胞核中.这些结果为进一步研究该基因的生物学功能及其调控机制奠定了基础.
為研究水稻汎素綴閤酶樣蛋白的序列特徵、基因錶達模式及亞細胞定位模式,採用逆轉錄聚閤酶鏈式反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),從水稻日本晴中鑒定併分離到1箇汎素綴閤酶樣蛋白基因即OsCROC-1A的開放閱讀框.序列分析結果錶明,該基因編碼1箇具有146箇氨基痠的蛋白質,含UBC保守功能域和催化位點D.比對分析結果錶明,OsCROC-1A蛋白與其他CROC-1蛋白之間具有很高的相似性(42.61％～84.14％).聚類分析結果也顯示齣良好的物種屬性.實時熒光定量PCR分析結果錶明,OsCROC-1A在水稻各組織中均有錶達,其中,在葉片、根、外稃中的錶達量相對較高,在內稃、莖、雌蕊、愈傷組織中的錶達量次之,而在雄蕊中的錶達量相對最低.經4℃低溫、20 mmol/L H2O2、0.01％甲基磺痠甲酯等脅迫處理使胚性愈傷中的OsCROC-1A錶達量顯著上調,經300 mmol/L甘露醇、100 μmol/L脫落痠、200 mmol/L NaC1脅迫處理則使愈傷組織中的OsCROC-1A錶達量降低.OsCROC-1A與EGFP的融閤蛋白錶達于細胞質及細胞覈中.這些結果為進一步研究該基因的生物學功能及其調控機製奠定瞭基礎.
위연구수도범소철합매양단백적서렬특정、기인표체모식급아세포정위모식,채용역전록취합매련식반응(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR),종수도일본청중감정병분리도1개범소철합매양단백기인즉OsCROC-1A적개방열독광.서렬분석결과표명,해기인편마1개구유146개안기산적단백질,함UBC보수공능역화최화위점D.비대분석결과표명,OsCROC-1A단백여기타CROC-1단백지간구유흔고적상사성(42.61％～84.14％).취류분석결과야현시출량호적물충속성.실시형광정량PCR분석결과표명,OsCROC-1A재수도각조직중균유표체,기중,재협편、근、외부중적표체량상대교고,재내부、경、자예、유상조직중적표체량차지,이재웅예중적표체량상대최저.경4℃저온、20 mmol/L H2O2、0.01％갑기광산갑지등협박처리사배성유상중적OsCROC-1A표체량현저상조,경300 mmol/L감로순、100 μmol/L탈락산、200 mmol/L NaC1협박처리칙사유상조직중적OsCROC-1A표체량강저.OsCROC-1A여EGFP적융합단백표체우세포질급세포핵중.저사결과위진일보연구해기인적생물학공능급기조공궤제전정료기출.
