新疆农业科学
新疆農業科學
신강농업과학
XINJIANG AGRICULTURAL SCIENCES
2013年
7期
1192-1198
,共7页
刘小利%郝晓燕%陈勋基%陈果%足木热木%邵琳%黄全生
劉小利%郝曉燕%陳勛基%陳果%足木熱木%邵琳%黃全生
류소리%학효연%진훈기%진과%족목열목%소림%황전생
玉米%ZmPsaH%真核表达载体%重组质粒构建
玉米%ZmPsaH%真覈錶達載體%重組質粒構建
옥미%ZmPsaH%진핵표체재체%중조질립구건
maize%ZmpsaH%eukaryotic expression vector%construction of recombinant plasmid
[目的]PsaH是光合系统Ⅰ(PSI)中的一个亚基,在植物光合系统中起着重要的作用.为研究玉米ZmPsaH基因在抗逆中的作用提供基础.[方法]构建玉米ZmPsaH基因真核表达载体是了解玉米中该基因功能的重要途径之一.利用RT-PCR技术扩增得到大小约为420 bp的玉米ZmPsaH基因,经限制性内切酶SalⅠ和NotⅠ进行消化,将目的基因与真核表达质粒pREP-5N连接,获得重组真核表达质粒ZmPsaH-5N.[结果]通过菌落PCR、双酶切及测序等方法进行鉴定,重组真核表达质粒ZmPsaH-5N构建成功.制备酵母感受态,将重组质粒电击转入酵母中,酵母菌落PCR结果显示电击转化成功.[结论]成功构建了玉米ZmPsaH基因真核表达载体,并且成功转化了酵母.
[目的]PsaH是光閤繫統Ⅰ(PSI)中的一箇亞基,在植物光閤繫統中起著重要的作用.為研究玉米ZmPsaH基因在抗逆中的作用提供基礎.[方法]構建玉米ZmPsaH基因真覈錶達載體是瞭解玉米中該基因功能的重要途徑之一.利用RT-PCR技術擴增得到大小約為420 bp的玉米ZmPsaH基因,經限製性內切酶SalⅠ和NotⅠ進行消化,將目的基因與真覈錶達質粒pREP-5N連接,穫得重組真覈錶達質粒ZmPsaH-5N.[結果]通過菌落PCR、雙酶切及測序等方法進行鑒定,重組真覈錶達質粒ZmPsaH-5N構建成功.製備酵母感受態,將重組質粒電擊轉入酵母中,酵母菌落PCR結果顯示電擊轉化成功.[結論]成功構建瞭玉米ZmPsaH基因真覈錶達載體,併且成功轉化瞭酵母.
[목적]PsaH시광합계통Ⅰ(PSI)중적일개아기,재식물광합계통중기착중요적작용.위연구옥미ZmPsaH기인재항역중적작용제공기출.[방법]구건옥미ZmPsaH기인진핵표체재체시료해옥미중해기인공능적중요도경지일.이용RT-PCR기술확증득도대소약위420 bp적옥미ZmPsaH기인,경한제성내절매SalⅠ화NotⅠ진행소화,장목적기인여진핵표체질립pREP-5N련접,획득중조진핵표체질립ZmPsaH-5N.[결과]통과균락PCR、쌍매절급측서등방법진행감정,중조진핵표체질립ZmPsaH-5N구건성공.제비효모감수태,장중조질립전격전입효모중,효모균락PCR결과현시전격전화성공.[결론]성공구건료옥미ZmPsaH기인진핵표체재체,병차성공전화료효모.
