抗猪PD-L1分子的单克隆抗体制备及免疫学特性分析
항저PD-L1분자적단극륭항체제비급면역학특성분석
Preparation of the anti-porcine PD-L1 monoclonal antibodies and analysis of their immunological characteristics
  • 万方数据
    中国预防兽医学报 중국예방수의학보
    CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
    2013年 7期 578-581 ,共4页

    彭金美%李登云%郭娟娟%安同庆%孙艳%吴玉全%陈家锃%冷超粮%田志军

    팽금미%리등운%곽연연%안동경%손염%오옥전%진가정%랭초량%전지군

    PPD-L1分子%PD-1/PD-L1通路%单克隆抗体 PPD-L1分子%PD-1/PD-L1通路%單剋隆抗體
    PPD-L1분자%PD-1/PD-L1통로%단극륭항체
    PD-L1,PD-1/PD-LI pathway%monoclonal antibody
    为制备抗猪程序性死亡因子配体1 (PD-L1)的单克隆抗体(MAb)并鉴定其免疫学特性,本研究将猪PD-L1基因的外膜区利用原核表达载体pET32a进行表达,以纯化的表达蛋白免疫BALB/c小鼠,利用常规淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,以表达PD-L1-Fc蛋白的293T细胞作为抗原,采用间接免疫荧光试验筛选杂交瘤培养上清,获得两株稳定分泌抗猪PD-L1 MAb的杂交瘤细胞系.MAb亚型鉴定均为IgG1型,轻链为(K)链.Western blot试验表明这两株MAb均可以特异性识别PD-L1蛋白.流式细胞检测结果显示这两株MAb可以识别表达于293T细胞膜表面的PD-L1分子,但不能阻断PD-L1分子与其受体PD-1的结合.这两株MAb的获得为研究PD-1/PD-L1通路与猪的某些感染性疾病发展进程的关系提供了必要的检测工具.
    위제비항저정서성사망인자배체1 (PD-L1)적단극륭항체(MAb)병감정기면역학특성,본연구장저PD-L1기인적외막구이용원핵표체재체pET32a진행표체,이순화적표체단백면역BALB/c소서,이용상규림파세포잡교류기술진행세포융합,이표체PD-L1-Fc단백적293T세포작위항원,채용간접면역형광시험사선잡교류배양상청,획득량주은정분비항저PD-L1 MAb적잡교류세포계.MAb아형감정균위IgG1형,경련위(K)련.Western blot시험표명저량주MAb균가이특이성식별PD-L1단백.류식세포검측결과현시저량주MAb가이식별표체우293T세포막표면적PD-L1분자,단불능조단PD-L1분자여기수체PD-1적결합.저량주MAb적획득위연구PD-1/PD-L1통로여저적모사감염성질병발전진정적관계제공료필요적검측공구.
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