中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
7期
546-549
,共4页
罗济冠%葛俊伟%姜艳平%崔文%乔薪瑗%唐丽杰%李一经
囉濟冠%葛俊偉%薑豔平%崔文%喬薪瑗%唐麗傑%李一經
라제관%갈준위%강염평%최문%교신원%당려걸%리일경
牛细小病毒%VP2基因%表达%抗原性分析
牛細小病毒%VP2基因%錶達%抗原性分析
우세소병독%VP2기인%표체%항원성분석
bovine parvovirus%VP2 gene%expression%analysis of antigenicity
为研究牛细小病毒(BPV)VP2蛋白免疫学相关功能,本研究采用PCR扩增得到BPV-1 VR767株VP2基因片段,测序后利用生物学软件分析VP2蛋白的抗原表位,选取抗原表位富集的3个基因片段VP2-1(100 bp～789 bp),VP2-2 (898 bp～1 353 bp)和VP2-3(1 450 bp～1 899 bp)分别克隆至原核表达载体pET-28a中,并转化E.coli中进行诱导表达.表达的重组蛋白经western blot和间接ELISA鉴定；用纯化的重组蛋白分别免疫小鼠,并用ELISA检测小鼠多克隆抗体特异性.结果显示:表达的3种重组蛋白分子量分别约为30.2 ku、22.9 ku和22.7 ku,均可以被BPV阳性血清识别.间接ELISA结果表明,3种重组蛋白均能够有效诱导抗体反应.其中,重组VP2-3诱导产生的抗体效价最高,与阳性血清的结合能力最强.该研究结果为研究VP2蛋白功能、建立BPV检测方法提供了基础材料.
為研究牛細小病毒(BPV)VP2蛋白免疫學相關功能,本研究採用PCR擴增得到BPV-1 VR767株VP2基因片段,測序後利用生物學軟件分析VP2蛋白的抗原錶位,選取抗原錶位富集的3箇基因片段VP2-1(100 bp～789 bp),VP2-2 (898 bp～1 353 bp)和VP2-3(1 450 bp～1 899 bp)分彆剋隆至原覈錶達載體pET-28a中,併轉化E.coli中進行誘導錶達.錶達的重組蛋白經western blot和間接ELISA鑒定；用純化的重組蛋白分彆免疫小鼠,併用ELISA檢測小鼠多剋隆抗體特異性.結果顯示:錶達的3種重組蛋白分子量分彆約為30.2 ku、22.9 ku和22.7 ku,均可以被BPV暘性血清識彆.間接ELISA結果錶明,3種重組蛋白均能夠有效誘導抗體反應.其中,重組VP2-3誘導產生的抗體效價最高,與暘性血清的結閤能力最彊.該研究結果為研究VP2蛋白功能、建立BPV檢測方法提供瞭基礎材料.
위연구우세소병독(BPV)VP2단백면역학상관공능,본연구채용PCR확증득도BPV-1 VR767주VP2기인편단,측서후이용생물학연건분석VP2단백적항원표위,선취항원표위부집적3개기인편단VP2-1(100 bp～789 bp),VP2-2 (898 bp～1 353 bp)화VP2-3(1 450 bp～1 899 bp)분별극륭지원핵표체재체pET-28a중,병전화E.coli중진행유도표체.표체적중조단백경western blot화간접ELISA감정；용순화적중조단백분별면역소서,병용ELISA검측소서다극륭항체특이성.결과현시:표체적3충중조단백분자량분별약위30.2 ku、22.9 ku화22.7 ku,균가이피BPV양성혈청식별.간접ELISA결과표명,3충중조단백균능구유효유도항체반응.기중,중조VP2-3유도산생적항체효개최고,여양성혈청적결합능력최강.해연구결과위연구VP2단백공능、건립BPV검측방법제공료기출재료.
