中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
7期
530-534
,共5页
王讲德%程婷婷%陈创夫%任艳%张辉%王远志%李蕊%李跃峰%倪伟
王講德%程婷婷%陳創伕%任豔%張輝%王遠誌%李蕊%李躍峰%倪偉
왕강덕%정정정%진창부%임염%장휘%왕원지%리예%리약봉%예위
致细胞病变牛病毒性腹泻病毒%牛肾细胞%miR-125b%荧光定量RT-PCR%流式细胞仪
緻細胞病變牛病毒性腹瀉病毒%牛腎細胞%miR-125b%熒光定量RT-PCR%流式細胞儀
치세포병변우병독성복사병독%우신세포%miR-125b%형광정량RT-PCR%류식세포의
cpBVDV%MDBK cells%miR-125b%qRT-PCR%flow cytometry
为研究miRNA-125b在致细胞病变牛病毒性腹泻病毒(cpBVDV)感染牛肾细胞(MDBK细胞)过程中诱导细胞凋亡的机制,本研究将cpBVDV感染MDBK细胞,并将构建的pcDNA-miR-125b转染MDBK细胞作为阳性对照.采用荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)检测细胞中miRNA-125b和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2) mRNA转录水平,通过流式细胞仪检测细胞凋亡率.检测结果显示,cpBVDV感染MDBK细胞12 h和24 h,细胞中miRNA-125b的转录水平分别为正常细胞对照组的2.01倍和3.85倍,Bcl-2 mRNA的转录水平分别为对照组的0.71倍和0.31倍；pcDNA-miR-125b转染MDBK细胞48 h后,Bcl-2 mRNA的转录水平为正常细胞对照组的0.42倍.细胞凋亡检测结果显示,cpBVDV感染MDBK细胞12 h和24 h,细胞的凋亡率分别为15.06％和36.43％;pcDNA3.1-miR-125b转染48 h,细胞的凋亡率为25.56％.结果表明miRNA-125b在cpBVDV感染MDBK细胞过程中能够通过抑制抗凋亡基因Bcl-2 mRNA转录水平从而诱导细胞产生凋亡.
為研究miRNA-125b在緻細胞病變牛病毒性腹瀉病毒(cpBVDV)感染牛腎細胞(MDBK細胞)過程中誘導細胞凋亡的機製,本研究將cpBVDV感染MDBK細胞,併將構建的pcDNA-miR-125b轉染MDBK細胞作為暘性對照.採用熒光定量RT-PCR (qRT-PCR)檢測細胞中miRNA-125b和B細胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2) mRNA轉錄水平,通過流式細胞儀檢測細胞凋亡率.檢測結果顯示,cpBVDV感染MDBK細胞12 h和24 h,細胞中miRNA-125b的轉錄水平分彆為正常細胞對照組的2.01倍和3.85倍,Bcl-2 mRNA的轉錄水平分彆為對照組的0.71倍和0.31倍；pcDNA-miR-125b轉染MDBK細胞48 h後,Bcl-2 mRNA的轉錄水平為正常細胞對照組的0.42倍.細胞凋亡檢測結果顯示,cpBVDV感染MDBK細胞12 h和24 h,細胞的凋亡率分彆為15.06％和36.43％;pcDNA3.1-miR-125b轉染48 h,細胞的凋亡率為25.56％.結果錶明miRNA-125b在cpBVDV感染MDBK細胞過程中能夠通過抑製抗凋亡基因Bcl-2 mRNA轉錄水平從而誘導細胞產生凋亡.
위연구miRNA-125b재치세포병변우병독성복사병독(cpBVDV)감염우신세포(MDBK세포)과정중유도세포조망적궤제,본연구장cpBVDV감염MDBK세포,병장구건적pcDNA-miR-125b전염MDBK세포작위양성대조.채용형광정량RT-PCR (qRT-PCR)검측세포중miRNA-125b화B세포림파류/백혈병-2(Bcl-2) mRNA전록수평,통과류식세포의검측세포조망솔.검측결과현시,cpBVDV감염MDBK세포12 h화24 h,세포중miRNA-125b적전록수평분별위정상세포대조조적2.01배화3.85배,Bcl-2 mRNA적전록수평분별위대조조적0.71배화0.31배；pcDNA-miR-125b전염MDBK세포48 h후,Bcl-2 mRNA적전록수평위정상세포대조조적0.42배.세포조망검측결과현시,cpBVDV감염MDBK세포12 h화24 h,세포적조망솔분별위15.06％화36.43％;pcDNA3.1-miR-125b전염48 h,세포적조망솔위25.56％.결과표명miRNA-125b재cpBVDV감염MDBK세포과정중능구통과억제항조망기인Bcl-2 mRNA전록수평종이유도세포산생조망.
