中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2013年
7期
517-520
,共4页
吴超%温志远%陈伟业%施建忠%葛金英%步志高
吳超%溫誌遠%陳偉業%施建忠%葛金英%步誌高
오초%온지원%진위업%시건충%갈금영%보지고
2009甲型H1N1流感病毒%跨膜丝氨酸蛋白酶-4%血凝素%细胞融合
2009甲型H1N1流感病毒%跨膜絲氨痠蛋白酶-4%血凝素%細胞融閤
2009갑형H1N1류감병독%과막사안산단백매-4%혈응소%세포융합
2009 pandemic influenza%TMPRSS4%hemagglutinin%cell fusion
流感病毒血凝素(HA)被宿主蛋白酶切割活化是流感病毒复制和扩散的关键步骤.2009甲型H1N1流感病毒HA的裂解位点为单碱性氨基酸,只能被宿主特定组织部位表达的某些蛋白酶所切割活化.本研究构建了主要存在于人呼吸道和肺脏的跨膜丝氨酸蛋白酶4 (TMPRSS4)的真核表达重组质粒pCA-TMPRSS4-Flag与表达2009甲型H1N1流感病毒中国四川分离株HA的真核重组表达质粒pCA-SCHA共转染293T细胞,利用westernblot证明2009甲型H1N1流感病毒的HA蛋白能够被TMPRSS4切割；通过激光共聚焦确定TMPRSS4和HA在293T细胞膜上共定位；并进一步通过细胞融合试验证明经正确切割的HA具有在低pH条件下介导细胞膜发生融合的生物学功能.本实验为研究自然感染情况下参与活化流感病毒的宿主胰蛋白酶提供了实验依据.
流感病毒血凝素(HA)被宿主蛋白酶切割活化是流感病毒複製和擴散的關鍵步驟.2009甲型H1N1流感病毒HA的裂解位點為單堿性氨基痠,隻能被宿主特定組織部位錶達的某些蛋白酶所切割活化.本研究構建瞭主要存在于人呼吸道和肺髒的跨膜絲氨痠蛋白酶4 (TMPRSS4)的真覈錶達重組質粒pCA-TMPRSS4-Flag與錶達2009甲型H1N1流感病毒中國四川分離株HA的真覈重組錶達質粒pCA-SCHA共轉染293T細胞,利用westernblot證明2009甲型H1N1流感病毒的HA蛋白能夠被TMPRSS4切割；通過激光共聚焦確定TMPRSS4和HA在293T細胞膜上共定位；併進一步通過細胞融閤試驗證明經正確切割的HA具有在低pH條件下介導細胞膜髮生融閤的生物學功能.本實驗為研究自然感染情況下參與活化流感病毒的宿主胰蛋白酶提供瞭實驗依據.
류감병독혈응소(HA)피숙주단백매절할활화시류감병독복제화확산적관건보취.2009갑형H1N1류감병독HA적렬해위점위단감성안기산,지능피숙주특정조직부위표체적모사단백매소절할활화.본연구구건료주요존재우인호흡도화폐장적과막사안산단백매4 (TMPRSS4)적진핵표체중조질립pCA-TMPRSS4-Flag여표체2009갑형H1N1류감병독중국사천분리주HA적진핵중조표체질립pCA-SCHA공전염293T세포,이용westernblot증명2009갑형H1N1류감병독적HA단백능구피TMPRSS4절할；통과격광공취초학정TMPRSS4화HA재293T세포막상공정위；병진일보통과세포융합시험증명경정학절할적HA구유재저pH조건하개도세포막발생융합적생물학공능.본실험위연구자연감염정황하삼여활화류감병독적숙주이단백매제공료실험의거.
