植物资源与环境学报
植物資源與環境學報
식물자원여배경학보
JOURNAL OF PLANT RESOURCES AND ENVIRONMENT
2013年
2期
1-7
,共7页
张计育%渠慎春%乔玉山%章镇%郭忠仁
張計育%渠慎春%喬玉山%章鎮%郭忠仁
장계육%거신춘%교옥산%장진%곽충인
湖北海棠%MhPR5基因%克隆%表达特性%生物胁迫%非生物胁迫
湖北海棠%MhPR5基因%剋隆%錶達特性%生物脅迫%非生物脅迫
호북해당%MhPR5기인%극륭%표체특성%생물협박%비생물협박
Malus hupehensis (Pamp.) Rehd.%MhPR5 gene%clone%expression characteristics%biotic stress%abiotic stress
从基因组DNA及经水杨酸处理的全长cDNA文库中分别克隆获得湖北海棠[Malus hupehensis(Pamp.)Rehd.]类甜蛋白基因MhPR5的全编码区序列,并对其进行生物信息学分析;利用实时荧光定量RT-PCR技术分析了该基因在湖北海棠各组织中的表达特性以及经非生物胁迫(200 mmol·L-1NaCl和4℃低温)和生物胁迫[苹果轮纹病病原菌(Physalospora piricola Nose)和苹果蚜虫(Aphis citricola van der Goot)]后MhPR5基因的表达特性.结果表明:克隆获得的MhPR5基因全编码区的cDNA序列长度为741 bp,编码246个氨基酸残基;该基因的基因组DNA序列长度为l 106 bp,包含1个内含子;该基因编码的蛋白质相对分子质量为25 520,等电点为pI 4.72.MhPR5基因的核苷酸序列与苹果(M.domestic Borkh.)、梨[Pyrus pyrifolia(Burm.f.)Nakai]和桃[Prunus persica (Linn.) Batsch.]PR5 基因核苷酸序列的同源性分别为98%、95%和82%,该基因编码的氨基酸序列与苹果、梨和桃PR5基因编码的氨基酸序列的同源性分别为97%、94%和52%.MhPR5基因编码的蛋白质含有16个保守的半胱氨酸残基和5个保守的带负电荷的氨基酸残基,在N端还含有1个由25个氨基酸残基组成的信号肽.MhPR5基因在湖北海棠组培苗的根、茎和叶中均能表达,在根中的相对表达量最高、叶中最低;生物和非生物胁迫均可诱导MhPR5基因的表达,说明MhPR5基因在湖北海棠抵御生物和非生物胁迫过程中可能具有非常重要的作用.
從基因組DNA及經水楊痠處理的全長cDNA文庫中分彆剋隆穫得湖北海棠[Malus hupehensis(Pamp.)Rehd.]類甜蛋白基因MhPR5的全編碼區序列,併對其進行生物信息學分析;利用實時熒光定量RT-PCR技術分析瞭該基因在湖北海棠各組織中的錶達特性以及經非生物脅迫(200 mmol·L-1NaCl和4℃低溫)和生物脅迫[蘋果輪紋病病原菌(Physalospora piricola Nose)和蘋果蚜蟲(Aphis citricola van der Goot)]後MhPR5基因的錶達特性.結果錶明:剋隆穫得的MhPR5基因全編碼區的cDNA序列長度為741 bp,編碼246箇氨基痠殘基;該基因的基因組DNA序列長度為l 106 bp,包含1箇內含子;該基因編碼的蛋白質相對分子質量為25 520,等電點為pI 4.72.MhPR5基因的覈苷痠序列與蘋果(M.domestic Borkh.)、梨[Pyrus pyrifolia(Burm.f.)Nakai]和桃[Prunus persica (Linn.) Batsch.]PR5 基因覈苷痠序列的同源性分彆為98%、95%和82%,該基因編碼的氨基痠序列與蘋果、梨和桃PR5基因編碼的氨基痠序列的同源性分彆為97%、94%和52%.MhPR5基因編碼的蛋白質含有16箇保守的半胱氨痠殘基和5箇保守的帶負電荷的氨基痠殘基,在N耑還含有1箇由25箇氨基痠殘基組成的信號肽.MhPR5基因在湖北海棠組培苗的根、莖和葉中均能錶達,在根中的相對錶達量最高、葉中最低;生物和非生物脅迫均可誘導MhPR5基因的錶達,說明MhPR5基因在湖北海棠牴禦生物和非生物脅迫過程中可能具有非常重要的作用.
종기인조DNA급경수양산처리적전장cDNA문고중분별극륭획득호북해당[Malus hupehensis(Pamp.)Rehd.]류첨단백기인MhPR5적전편마구서렬,병대기진행생물신식학분석;이용실시형광정량RT-PCR기술분석료해기인재호북해당각조직중적표체특성이급경비생물협박(200 mmol·L-1NaCl화4℃저온)화생물협박[평과륜문병병원균(Physalospora piricola Nose)화평과아충(Aphis citricola van der Goot)]후MhPR5기인적표체특성.결과표명:극륭획득적MhPR5기인전편마구적cDNA서렬장도위741 bp,편마246개안기산잔기;해기인적기인조DNA서렬장도위l 106 bp,포함1개내함자;해기인편마적단백질상대분자질량위25 520,등전점위pI 4.72.MhPR5기인적핵감산서렬여평과(M.domestic Borkh.)、리[Pyrus pyrifolia(Burm.f.)Nakai]화도[Prunus persica (Linn.) Batsch.]PR5 기인핵감산서렬적동원성분별위98%、95%화82%,해기인편마적안기산서렬여평과、리화도PR5기인편마적안기산서렬적동원성분별위97%、94%화52%.MhPR5기인편마적단백질함유16개보수적반광안산잔기화5개보수적대부전하적안기산잔기,재N단환함유1개유25개안기산잔기조성적신호태.MhPR5기인재호북해당조배묘적근、경화협중균능표체,재근중적상대표체량최고、협중최저;생물화비생물협박균가유도MhPR5기인적표체,설명MhPR5기인재호북해당저어생물화비생물협박과정중가능구유비상중요적작용.