山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2013年
32期
25-27
,共3页
王涛%邢昌赢%袁自静%钱军%赵秀芬%朱江
王濤%邢昌贏%袁自靜%錢軍%趙秀芬%硃江
왕도%형창영%원자정%전군%조수분%주강
糖皮质激素受体%腺病毒%载体%转染%大鼠
糖皮質激素受體%腺病毒%載體%轉染%大鼠
당피질격소수체%선병독%재체%전염%대서
目的 构建大鼠糖皮质激素受体(GR)基因到Ad5/F35型腺病毒载体并鉴定.方法 将pcDNAl Neo-Rat GR的质粒经酶切获得Rat GR cDNA酶切片段,与载体质粒pDC316的酶切片段一同转染到感受态大肠杆菌DH-5α中,构建重组穿梭载体pDC316-GR;进行PCR、酶切、测序鉴定,确定构建成功后与腺病毒骨架质粒Ad5/F35一同转染到293细胞进行同源重组,得到Ad35-GR毒种,并进行PCR鉴定.结果 经酶切、PCR方法鉴定构建了大鼠GR的重组腺病毒,氯化铯梯度离心纯化最终获得2.8×1011 PFU/mL滴度的重组病毒.结论 成功构建了大鼠GR的高滴度重组腺病毒.
目的 構建大鼠糖皮質激素受體(GR)基因到Ad5/F35型腺病毒載體併鑒定.方法 將pcDNAl Neo-Rat GR的質粒經酶切穫得Rat GR cDNA酶切片段,與載體質粒pDC316的酶切片段一同轉染到感受態大腸桿菌DH-5α中,構建重組穿梭載體pDC316-GR;進行PCR、酶切、測序鑒定,確定構建成功後與腺病毒骨架質粒Ad5/F35一同轉染到293細胞進行同源重組,得到Ad35-GR毒種,併進行PCR鑒定.結果 經酶切、PCR方法鑒定構建瞭大鼠GR的重組腺病毒,氯化銫梯度離心純化最終穫得2.8×1011 PFU/mL滴度的重組病毒.結論 成功構建瞭大鼠GR的高滴度重組腺病毒.
목적 구건대서당피질격소수체(GR)기인도Ad5/F35형선병독재체병감정.방법 장pcDNAl Neo-Rat GR적질립경매절획득Rat GR cDNA매절편단,여재체질립pDC316적매절편단일동전염도감수태대장간균DH-5α중,구건중조천사재체pDC316-GR;진행PCR、매절、측서감정,학정구건성공후여선병독골가질립Ad5/F35일동전염도293세포진행동원중조,득도Ad35-GR독충,병진행PCR감정.결과 경매절、PCR방법감정구건료대서GR적중조선병독,록화색제도리심순화최종획득2.8×1011 PFU/mL적도적중조병독.결론 성공구건료대서GR적고적도중조선병독.
