中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2013年
9期
886-890
,共5页
陈峰%吴尔翔%丁锁顺%邵亚平%章杰%唐晓宇
陳峰%吳爾翔%丁鎖順%邵亞平%章傑%唐曉宇
진봉%오이상%정쇄순%소아평%장걸%당효우
二聚体蝎型探针%荧光定量PCR%志贺菌%分子探针
二聚體蝎型探針%熒光定量PCR%誌賀菌%分子探針
이취체갈형탐침%형광정량PCR%지하균%분자탐침
目的 利用二聚体蝎型荧光探针法,建立一种可广泛应用且敏感、特异的检测志贺菌的荧光定量PCR技术.方法 根据编码志贺菌ipaH基因的核苷酸序列设计引物和荧光探针,采用基因重组技术构建用于志贺菌检测的定量标准品,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立了检测志贺菌的二聚体蝎型探针定量PCR方法.结果 成功构建了志贺菌重组质粒标准品和志贺菌实时荧光定量PCR方法;通过特异性、敏感性、稳定性和重复性验证,结果表明具有较好的特异性、敏感性、稳定性和重复性;对比分离培养标本,二者符合率为100%;对比TaqMan方法,本方法具有更敏感、省时、成本低的特点.结论 建立了一种以二聚体蝎型荧光探针技术为基础的志贺菌荧光定量PCR检测法,为研制新型的检测试剂盒奠定了基础,可应用于食品卫生监管以及传染病诊断等.
目的 利用二聚體蝎型熒光探針法,建立一種可廣汎應用且敏感、特異的檢測誌賀菌的熒光定量PCR技術.方法 根據編碼誌賀菌ipaH基因的覈苷痠序列設計引物和熒光探針,採用基因重組技術構建用于誌賀菌檢測的定量標準品,通過對熒光定量PCR反應體繫和反應條件的摸索,建立瞭檢測誌賀菌的二聚體蝎型探針定量PCR方法.結果 成功構建瞭誌賀菌重組質粒標準品和誌賀菌實時熒光定量PCR方法;通過特異性、敏感性、穩定性和重複性驗證,結果錶明具有較好的特異性、敏感性、穩定性和重複性;對比分離培養標本,二者符閤率為100%;對比TaqMan方法,本方法具有更敏感、省時、成本低的特點.結論 建立瞭一種以二聚體蝎型熒光探針技術為基礎的誌賀菌熒光定量PCR檢測法,為研製新型的檢測試劑盒奠定瞭基礎,可應用于食品衛生鑑管以及傳染病診斷等.
목적 이용이취체갈형형광탐침법,건립일충가엄범응용차민감、특이적검측지하균적형광정량PCR기술.방법 근거편마지하균ipaH기인적핵감산서렬설계인물화형광탐침,채용기인중조기술구건용우지하균검측적정량표준품,통과대형광정량PCR반응체계화반응조건적모색,건립료검측지하균적이취체갈형탐침정량PCR방법.결과 성공구건료지하균중조질립표준품화지하균실시형광정량PCR방법;통과특이성、민감성、은정성화중복성험증,결과표명구유교호적특이성、민감성、은정성화중복성;대비분리배양표본,이자부합솔위100%;대비TaqMan방법,본방법구유경민감、성시、성본저적특점.결론 건립료일충이이취체갈형형광탐침기술위기출적지하균형광정량PCR검측법,위연제신형적검측시제합전정료기출,가응용우식품위생감관이급전염병진단등.
