宁夏医学杂志
寧夏醫學雜誌
저하의학잡지
NINGXIA MEDICAL JOURNAL
2013年
9期
785-787
,共3页
张彬%张霞%毕逢辰%高永才%郑亚莉
張彬%張霞%畢逢辰%高永纔%鄭亞莉
장빈%장하%필봉신%고영재%정아리
周期素依赖性蛋白激酶5%Cdk5活性抑制肽%胰岛素%p5%FTP5
週期素依賴性蛋白激酶5%Cdk5活性抑製肽%胰島素%p5%FTP5
주기소의뢰성단백격매5%Cdk5활성억제태%이도소%p5%FTP5
目的 探讨FTP5通过抑制周期素依赖性蛋白激酶(Cdk5)活性调节高糖环境下胰岛β细胞分泌胰岛素的作用.方法 体外培养小鼠胰岛β细胞株(Min6细胞).①体外抑制实验.将Cdk5活性抑制肽(CIP)和P5蛋白与Cdk5+p25激酶在试管混匀测定酶的活性,分为:p25+Cdk5组、p25+Cdk5+CIP组,p25+Cdk5+P5组.②细胞内试验.应用腺病毒表达空载体(EV),含有p5的重组腺病毒(p5)、和FITC-TAT合成的短肽(FTP5),分别转染细胞并给不同浓度的葡萄糖3 mmol(低糖,LG)和25 mmol(高糖,HG)刺激,分组为LG+EV组、HG+EV组、HG+FTP5组、HG+p5组.用免疫印迹和免疫荧光检测Cdk5和p35等蛋白表达,同位素标记测定Cdk5的活性,酶联免疫吸附试验测定胰岛素的分泌水平.结果 p5与CIP均可抑制Cdk5的活性,且前者的抑制作用更强;①高糖可以诱发p35表达增高,抑制胰岛素分泌;②FTP5和p5均抑制在高糖(25 mmoL)刺激下的Cdk5活性、恢复胰岛素的分泌,FTP5的作用更强(P＜0.05).结论 FTP5可以抑制Cdk5的过度活性,恢复胰岛素分泌,在2型糖尿病治疗中可能有潜在的广阔前景.
目的 探討FTP5通過抑製週期素依賴性蛋白激酶(Cdk5)活性調節高糖環境下胰島β細胞分泌胰島素的作用.方法 體外培養小鼠胰島β細胞株(Min6細胞).①體外抑製實驗.將Cdk5活性抑製肽(CIP)和P5蛋白與Cdk5+p25激酶在試管混勻測定酶的活性,分為:p25+Cdk5組、p25+Cdk5+CIP組,p25+Cdk5+P5組.②細胞內試驗.應用腺病毒錶達空載體(EV),含有p5的重組腺病毒(p5)、和FITC-TAT閤成的短肽(FTP5),分彆轉染細胞併給不同濃度的葡萄糖3 mmol(低糖,LG)和25 mmol(高糖,HG)刺激,分組為LG+EV組、HG+EV組、HG+FTP5組、HG+p5組.用免疫印跡和免疫熒光檢測Cdk5和p35等蛋白錶達,同位素標記測定Cdk5的活性,酶聯免疫吸附試驗測定胰島素的分泌水平.結果 p5與CIP均可抑製Cdk5的活性,且前者的抑製作用更彊;①高糖可以誘髮p35錶達增高,抑製胰島素分泌;②FTP5和p5均抑製在高糖(25 mmoL)刺激下的Cdk5活性、恢複胰島素的分泌,FTP5的作用更彊(P＜0.05).結論 FTP5可以抑製Cdk5的過度活性,恢複胰島素分泌,在2型糖尿病治療中可能有潛在的廣闊前景.
목적 탐토FTP5통과억제주기소의뢰성단백격매(Cdk5)활성조절고당배경하이도β세포분비이도소적작용.방법 체외배양소서이도β세포주(Min6세포).①체외억제실험.장Cdk5활성억제태(CIP)화P5단백여Cdk5+p25격매재시관혼균측정매적활성,분위:p25+Cdk5조、p25+Cdk5+CIP조,p25+Cdk5+P5조.②세포내시험.응용선병독표체공재체(EV),함유p5적중조선병독(p5)、화FITC-TAT합성적단태(FTP5),분별전염세포병급불동농도적포도당3 mmol(저당,LG)화25 mmol(고당,HG)자격,분조위LG+EV조、HG+EV조、HG+FTP5조、HG+p5조.용면역인적화면역형광검측Cdk5화p35등단백표체,동위소표기측정Cdk5적활성,매련면역흡부시험측정이도소적분비수평.결과 p5여CIP균가억제Cdk5적활성,차전자적억제작용경강;①고당가이유발p35표체증고,억제이도소분비;②FTP5화p5균억제재고당(25 mmoL)자격하적Cdk5활성、회복이도소적분비,FTP5적작용경강(P＜0.05).결론 FTP5가이억제Cdk5적과도활성,회복이도소분비,재2형당뇨병치료중가능유잠재적엄활전경.
