寄生虫与医学昆虫学报
寄生蟲與醫學昆蟲學報
기생충여의학곤충학보
ACTA PARASITOLOGICA ET MEDICA ENTOMOLOGICA SINICA
2013年
2期
102-109
,共8页
王欣%孙毅%牛思博%蒋宝贵
王訢%孫毅%牛思博%蔣寶貴
왕흔%손의%우사박%장보귀
涎腺蛋白%全沟硬蜱%宿主免疫%克隆%表达
涎腺蛋白%全溝硬蜱%宿主免疫%剋隆%錶達
연선단백%전구경비%숙주면역%극륭%표체
Salp15%Ixodes persulcatus%host immunity%clone%expression
为明确全沟硬蜱涎腺Salp15蛋白家族的基因表达情况,本文根据已知的Salp15序列设计引物对全沟硬蜱幼蜱的总RNA进行RT-PCR,克隆到可与莱姆病螺旋体外膜蛋白OspC互作的涎腺蛋白Salp15 CDS序列,命名为Ⅰ.p larva5.对该蛋白做生物信息学预测,其肽链在N端含有信号肽,在C端含有与CD4分子的结合位点.与其他蜱种Salp15蛋白的相似性分别为:62.3％(北美的肩突硬蜱Ixodes scapularis)、74.5％(欧洲的篦子硬蜱Ⅰ.ricinus iric3)、59.4％(西伯利亚全沟硬蜱Ⅰ.persulcatus)、67.6％(日本地区的全沟硬蜱iper1).将该cDNA序列分别加上EcoR Ⅰ,SalⅠ酶切位点,插入pMAL-c4X表达载体上,经IPTG诱导,在Transetta (DE3)上融合蛋白成功表达.此工作为研究全沟硬蜱的Salp15与莱姆病螺旋体,以及与宿主动物的相互关系奠定了基础.
為明確全溝硬蜱涎腺Salp15蛋白傢族的基因錶達情況,本文根據已知的Salp15序列設計引物對全溝硬蜱幼蜱的總RNA進行RT-PCR,剋隆到可與萊姆病螺鏇體外膜蛋白OspC互作的涎腺蛋白Salp15 CDS序列,命名為Ⅰ.p larva5.對該蛋白做生物信息學預測,其肽鏈在N耑含有信號肽,在C耑含有與CD4分子的結閤位點.與其他蜱種Salp15蛋白的相似性分彆為:62.3％(北美的肩突硬蜱Ixodes scapularis)、74.5％(歐洲的篦子硬蜱Ⅰ.ricinus iric3)、59.4％(西伯利亞全溝硬蜱Ⅰ.persulcatus)、67.6％(日本地區的全溝硬蜱iper1).將該cDNA序列分彆加上EcoR Ⅰ,SalⅠ酶切位點,插入pMAL-c4X錶達載體上,經IPTG誘導,在Transetta (DE3)上融閤蛋白成功錶達.此工作為研究全溝硬蜱的Salp15與萊姆病螺鏇體,以及與宿主動物的相互關繫奠定瞭基礎.
위명학전구경비연선Salp15단백가족적기인표체정황,본문근거이지적Salp15서렬설계인물대전구경비유비적총RNA진행RT-PCR,극륭도가여래모병라선체외막단백OspC호작적연선단백Salp15 CDS서렬,명명위Ⅰ.p larva5.대해단백주생물신식학예측,기태련재N단함유신호태,재C단함유여CD4분자적결합위점.여기타비충Salp15단백적상사성분별위:62.3％(북미적견돌경비Ixodes scapularis)、74.5％(구주적비자경비Ⅰ.ricinus iric3)、59.4％(서백리아전구경비Ⅰ.persulcatus)、67.6％(일본지구적전구경비iper1).장해cDNA서렬분별가상EcoR Ⅰ,SalⅠ매절위점,삽입pMAL-c4X표체재체상,경IPTG유도,재Transetta (DE3)상융합단백성공표체.차공작위연구전구경비적Salp15여래모병라선체,이급여숙주동물적상호관계전정료기출.
