农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2013年
8期
940-948
,共9页
郭余龙%邹世慧%王会平%杨子%葛文东%邓菊庆%李名扬
郭餘龍%鄒世慧%王會平%楊子%葛文東%鄧菊慶%李名颺
곽여룡%추세혜%왕회평%양자%갈문동%산국경%리명양
矮牵牛%赤霉素2-氧化酶%表达模式%转基因%赤霉素缺乏植株
矮牽牛%赤黴素2-氧化酶%錶達模式%轉基因%赤黴素缺乏植株
왜견우%적매소2-양화매%표체모식%전기인%적매소결핍식주
Petunia%Gibberellin 2-oxidase gene%Expression pattern%Transgenic%Gibberellin-deficient plants
赤霉素(GA)是一类重要的植物内源性激素,在植物生长和发育过程中发挥重要的作用,其调控作用也极大地影响观赏植物的观赏性.矮牵牛(Petunia hybrida Vilm)是进行比较基因组学研究的优良材料,同时也是一个模式观赏植物.目前,在拟南芥(Arabidopsis thaliana)和水稻(Oryza sativa)中,大多数与赤霉素生物合成和降解相关的基因已经被克隆和研究,但在矮牵牛中鲜有相关的研究报道.本实验利用RACE技术从矮牵牛中获得了3个赤霉素2-氧化酶的全长cDNA序列,分别命名为PhGA20x1~3(登录号:GU059939、JQ323102和JQ323101).系统发生分析显示这3个基因都属于C19GA2氧化酶分支,与番茄(Solanum lycopersicum)的SlGA20x2,4和5,烟草(Nicotiana tabacum)的NtGA20x1~3最为接近.荧光定量PCR分析表明,PhGA20x1~3的表达谱相似,均在茎、叶、开花第一天的雄蕊和雌蕊、开始萎焉的花瓣中有较高的表达,在萼片、开花第一天的花瓣、授粉后7d的果实中表达量极低.不过,PhGA20x3 mRNA的丰度较PhGA20x1和2的低很多,当使用相同的模板和扩增效率相似的引物时,其Ct值较PhGA20x1和2的分别低4~5个循环(Ct PhGA2ox1~26,Ct PhGA2ox2~25,Ct PhGA2ox3~30).利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumef aciens)介导法获得2×35S::PhGA20x1转基因矮牵牛植株表现出节间长度明显变短、叶色变深等缺乏赤霉素的表型,提示了PhGA20x1可能编码一个功能基因.
赤黴素(GA)是一類重要的植物內源性激素,在植物生長和髮育過程中髮揮重要的作用,其調控作用也極大地影響觀賞植物的觀賞性.矮牽牛(Petunia hybrida Vilm)是進行比較基因組學研究的優良材料,同時也是一箇模式觀賞植物.目前,在擬南芥(Arabidopsis thaliana)和水稻(Oryza sativa)中,大多數與赤黴素生物閤成和降解相關的基因已經被剋隆和研究,但在矮牽牛中鮮有相關的研究報道.本實驗利用RACE技術從矮牽牛中穫得瞭3箇赤黴素2-氧化酶的全長cDNA序列,分彆命名為PhGA20x1~3(登錄號:GU059939、JQ323102和JQ323101).繫統髮生分析顯示這3箇基因都屬于C19GA2氧化酶分支,與番茄(Solanum lycopersicum)的SlGA20x2,4和5,煙草(Nicotiana tabacum)的NtGA20x1~3最為接近.熒光定量PCR分析錶明,PhGA20x1~3的錶達譜相似,均在莖、葉、開花第一天的雄蕊和雌蕊、開始萎焉的花瓣中有較高的錶達,在萼片、開花第一天的花瓣、授粉後7d的果實中錶達量極低.不過,PhGA20x3 mRNA的豐度較PhGA20x1和2的低很多,噹使用相同的模闆和擴增效率相似的引物時,其Ct值較PhGA20x1和2的分彆低4~5箇循環(Ct PhGA2ox1~26,Ct PhGA2ox2~25,Ct PhGA2ox3~30).利用根癌農桿菌(Agrobacterium tumef aciens)介導法穫得2×35S::PhGA20x1轉基因矮牽牛植株錶現齣節間長度明顯變短、葉色變深等缺乏赤黴素的錶型,提示瞭PhGA20x1可能編碼一箇功能基因.
적매소(GA)시일류중요적식물내원성격소,재식물생장화발육과정중발휘중요적작용,기조공작용야겁대지영향관상식물적관상성.왜견우(Petunia hybrida Vilm)시진행비교기인조학연구적우량재료,동시야시일개모식관상식물.목전,재의남개(Arabidopsis thaliana)화수도(Oryza sativa)중,대다수여적매소생물합성화강해상관적기인이경피극륭화연구,단재왜견우중선유상관적연구보도.본실험이용RACE기술종왜견우중획득료3개적매소2-양화매적전장cDNA서렬,분별명명위PhGA20x1~3(등록호:GU059939、JQ323102화JQ323101).계통발생분석현시저3개기인도속우C19GA2양화매분지,여번가(Solanum lycopersicum)적SlGA20x2,4화5,연초(Nicotiana tabacum)적NtGA20x1~3최위접근.형광정량PCR분석표명,PhGA20x1~3적표체보상사,균재경、협、개화제일천적웅예화자예、개시위언적화판중유교고적표체,재악편、개화제일천적화판、수분후7d적과실중표체량겁저.불과,PhGA20x3 mRNA적봉도교PhGA20x1화2적저흔다,당사용상동적모판화확증효솔상사적인물시,기Ct치교PhGA20x1화2적분별저4~5개순배(Ct PhGA2ox1~26,Ct PhGA2ox2~25,Ct PhGA2ox3~30).이용근암농간균(Agrobacterium tumef aciens)개도법획득2×35S::PhGA20x1전기인왜견우식주표현출절간장도명현변단、협색변심등결핍적매소적표형,제시료PhGA20x1가능편마일개공능기인.