临床与实验病理学杂志
臨床與實驗病理學雜誌
림상여실험병이학잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL PATHOLOGY
2014年
6期
641-645
,共5页
王合梅%康朋朋%张景坤%王冀%张玉军%黄洁
王閤梅%康朋朋%張景坤%王冀%張玉軍%黃潔
왕합매%강붕붕%장경곤%왕기%장옥군%황길
狼疮性肾炎%高迁移率族蛋白1%Akt%NF-κB%细胞增殖
狼瘡性腎炎%高遷移率族蛋白1%Akt%NF-κB%細胞增殖
랑창성신염%고천이솔족단백1%Akt%NF-κB%세포증식
lupus%nephritis%high%mobility%group%box%1%Akt%NF-κB%cell%proliferation
目的 探讨Akt/NF-κB信号途径激活在高迁移率族蛋白1(high mobility group protein box 1,HMGB1)诱导小鼠系膜细胞增殖中的作用及意义.方法 将常规培养的小鼠系膜细胞随机分为正常对照组和100μg/L HMGB1刺激组;HMGB1刺激+sh-Akt组(质粒转染组)、HMGB1刺激+sh-NC组(空白质粒组)分别培养10 min、20 min、30 min、40 min、50 min、1h和8h收集细胞,采用Real-time PCR及Western blot技术检测Akt、p-Akt、PTEN、PCNA、Cyclin D1、CDK4、p16的表达,免疫荧光技术检测BrdU和NF-κB p65蛋白表达.结果 (1)重组的HMGB1能够促进小鼠系膜细胞Akt ser473位点磷酸化和NF-κB核转位;(2)沉默细胞中Akt表达能够显著降低HMGB1诱导的系膜细胞增殖;BrdU阳性率降低;(3)沉默Akt表达显著降低HMGB1诱导的系膜细胞中Cyclin D1、CDK4的表达,上调p16表达;(4)沉默Akt表达能够降低HMGB1诱导的NF-κB核转位,细胞核内NF-κB p65阳性表达降低.结论 PI3 K/Akt激活参与HMGB1介导的小鼠系膜细胞增殖,促进NF-κB核转录,激活CyclinD1/CDK4/p16信号途经可能是其重要的机制之一.
目的 探討Akt/NF-κB信號途徑激活在高遷移率族蛋白1(high mobility group protein box 1,HMGB1)誘導小鼠繫膜細胞增殖中的作用及意義.方法 將常規培養的小鼠繫膜細胞隨機分為正常對照組和100μg/L HMGB1刺激組;HMGB1刺激+sh-Akt組(質粒轉染組)、HMGB1刺激+sh-NC組(空白質粒組)分彆培養10 min、20 min、30 min、40 min、50 min、1h和8h收集細胞,採用Real-time PCR及Western blot技術檢測Akt、p-Akt、PTEN、PCNA、Cyclin D1、CDK4、p16的錶達,免疫熒光技術檢測BrdU和NF-κB p65蛋白錶達.結果 (1)重組的HMGB1能夠促進小鼠繫膜細胞Akt ser473位點燐痠化和NF-κB覈轉位;(2)沉默細胞中Akt錶達能夠顯著降低HMGB1誘導的繫膜細胞增殖;BrdU暘性率降低;(3)沉默Akt錶達顯著降低HMGB1誘導的繫膜細胞中Cyclin D1、CDK4的錶達,上調p16錶達;(4)沉默Akt錶達能夠降低HMGB1誘導的NF-κB覈轉位,細胞覈內NF-κB p65暘性錶達降低.結論 PI3 K/Akt激活參與HMGB1介導的小鼠繫膜細胞增殖,促進NF-κB覈轉錄,激活CyclinD1/CDK4/p16信號途經可能是其重要的機製之一.
목적 탐토Akt/NF-κB신호도경격활재고천이솔족단백1(high mobility group protein box 1,HMGB1)유도소서계막세포증식중적작용급의의.방법 장상규배양적소서계막세포수궤분위정상대조조화100μg/L HMGB1자격조;HMGB1자격+sh-Akt조(질립전염조)、HMGB1자격+sh-NC조(공백질립조)분별배양10 min、20 min、30 min、40 min、50 min、1h화8h수집세포,채용Real-time PCR급Western blot기술검측Akt、p-Akt、PTEN、PCNA、Cyclin D1、CDK4、p16적표체,면역형광기술검측BrdU화NF-κB p65단백표체.결과 (1)중조적HMGB1능구촉진소서계막세포Akt ser473위점린산화화NF-κB핵전위;(2)침묵세포중Akt표체능구현저강저HMGB1유도적계막세포증식;BrdU양성솔강저;(3)침묵Akt표체현저강저HMGB1유도적계막세포중Cyclin D1、CDK4적표체,상조p16표체;(4)침묵Akt표체능구강저HMGB1유도적NF-κB핵전위,세포핵내NF-κB p65양성표체강저.결론 PI3 K/Akt격활삼여HMGB1개도적소서계막세포증식,촉진NF-κB핵전록,격활CyclinD1/CDK4/p16신호도경가능시기중요적궤제지일.
