分子诊断与治疗杂志
分子診斷與治療雜誌
분자진단여치료잡지
JOURNAL OF MOLECULAR DIAGNOSIS AND THERAPY
2014年
4期
250-253
,共4页
陈泽惠%李欣钰%肖湘文%丁渭%刘淑园%陈华云
陳澤惠%李訢鈺%肖湘文%丁渭%劉淑園%陳華雲
진택혜%리흔옥%초상문%정위%류숙완%진화운
乙型肝炎病毒HBV%MGB探针%荧光定量PCR
乙型肝炎病毒HBV%MGB探針%熒光定量PCR
을형간염병독HBV%MGB탐침%형광정량PCR
目的 检测血浆或血清样本中人乙型肝炎病毒HBV的基因型,建立了基于MGB探针的实时荧光定量PCR检测体系. 方法 在HBV基因组型特异性碱基的聚集区域设计荧光定量PCR引物及探针,为保证特征特异性及高分辨率,选择设计MGB探针,然后将PCR扩增的产物纯化后进行基因克隆,克隆成功后提取的质粒制备为阳性质控品,从而建立完整的MGB探针法的荧光定量PCR检测体系,最后对该检测体系进行方法学评价. 结果 成功建立了基于MGB探针的HBV荧光定量PCR的基因分型检测体系.方法学评价显示,该检测体系的灵敏度达50 IU/mL;重复性好;特异性良好,以多种血浆病毒的核酸样品为模板进行检测时结果全为阴性. 结论 本研究建立基于MGB探针的HBV荧光定量PCR的基因分型检测方法,可以很好地定性的检测血浆或血清样本及血液制品中的人乙型肝炎病毒HBV的基因型及含量,对于该疾病的临床治疗具有重要的意义.
目的 檢測血漿或血清樣本中人乙型肝炎病毒HBV的基因型,建立瞭基于MGB探針的實時熒光定量PCR檢測體繫. 方法 在HBV基因組型特異性堿基的聚集區域設計熒光定量PCR引物及探針,為保證特徵特異性及高分辨率,選擇設計MGB探針,然後將PCR擴增的產物純化後進行基因剋隆,剋隆成功後提取的質粒製備為暘性質控品,從而建立完整的MGB探針法的熒光定量PCR檢測體繫,最後對該檢測體繫進行方法學評價. 結果 成功建立瞭基于MGB探針的HBV熒光定量PCR的基因分型檢測體繫.方法學評價顯示,該檢測體繫的靈敏度達50 IU/mL;重複性好;特異性良好,以多種血漿病毒的覈痠樣品為模闆進行檢測時結果全為陰性. 結論 本研究建立基于MGB探針的HBV熒光定量PCR的基因分型檢測方法,可以很好地定性的檢測血漿或血清樣本及血液製品中的人乙型肝炎病毒HBV的基因型及含量,對于該疾病的臨床治療具有重要的意義.
목적 검측혈장혹혈청양본중인을형간염병독HBV적기인형,건립료기우MGB탐침적실시형광정량PCR검측체계. 방법 재HBV기인조형특이성감기적취집구역설계형광정량PCR인물급탐침,위보증특정특이성급고분변솔,선택설계MGB탐침,연후장PCR확증적산물순화후진행기인극륭,극륭성공후제취적질립제비위양성질공품,종이건립완정적MGB탐침법적형광정량PCR검측체계,최후대해검측체계진행방법학평개. 결과 성공건립료기우MGB탐침적HBV형광정량PCR적기인분형검측체계.방법학평개현시,해검측체계적령민도체50 IU/mL;중복성호;특이성량호,이다충혈장병독적핵산양품위모판진행검측시결과전위음성. 결론 본연구건립기우MGB탐침적HBV형광정량PCR적기인분형검측방법,가이흔호지정성적검측혈장혹혈청양본급혈액제품중적인을형간염병독HBV적기인형급함량,대우해질병적림상치료구유중요적의의.
