中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
3期
411-417
,共7页
沈国林%庄笑梅%谭妍%原梅%李桦%高月
瀋國林%莊笑梅%譚妍%原梅%李樺%高月
침국림%장소매%담연%원매%리화%고월
异鼠李素%阿魏酸%肝细胞%生物转运,主动
異鼠李素%阿魏痠%肝細胞%生物轉運,主動
이서리소%아위산%간세포%생물전운,주동
isorhamnetin%ferulic acid%hepatocytes%biological transport,active
目的 建立大鼠原代肝细胞摄取模型,评价异鼠李素和阿魏酸的肝细胞摄取性质.方法 应用RT-qPCR技术测定0,0.5,2和4h悬浮培养原代大鼠肝细胞上摄取转运体有机阴离子转运多肽(Oatp)1和Oatp2,有机阴离子转运体(Oat)2和有机阳离子转运体(Oct)1的mRNA表达.应用已知底物非索非那定、普伐他汀、甲氨蝶呤和阿昔洛韦评价转运体的功能.将已知底物或受试药物在4℃和37℃分别与肝细胞孵育不同时间,LC-MS/MS定量测定细胞摄取量,考察温度和时间对底物摄取的影响.由浓度依赖的摄取实验,计算得到Km、Vmax和主动摄取率等参数.在肝细胞模型上,将转运体的阳性抑制剂与异鼠李素10 μmol·L-1和阿魏酸50 μmol· L-1共孵育2 min,观察抑制剂对受试药转运的影响.结果 悬浮培养大鼠原代肝细胞上表达有转运体Oatp1,Oatp2,Oat2和Oct1,并能介导已知底物的主动摄取.转运体的mRNA表达水平随着时间的延长而快速下降,4h的表达水平约为0h的10％.转运体对已知底物摄取活性也随时间呈下降趋势,但程度显著低于表达水平,4h的活性约为0h的28.7％ ～71.4％.在经验证的肝细胞模型上,异鼠李素的4℃和37℃摄取无显著差异,主动转运率为14.6％.阿魏酸在37℃的摄取量显著高于4℃,主动转运率为84.1％；Oct阳性抑制剂奎尼丁100 μmol· L-1能显著抑制阿魏酸的肝摄取,抑制率为64.9％.结论 成功建立了大鼠原代肝细胞摄取模型,并用底物进行了验证.异鼠李素通过被动扩散进入肝细胞,阿魏酸的肝细胞摄取则以主动转运为主.
目的 建立大鼠原代肝細胞攝取模型,評價異鼠李素和阿魏痠的肝細胞攝取性質.方法 應用RT-qPCR技術測定0,0.5,2和4h懸浮培養原代大鼠肝細胞上攝取轉運體有機陰離子轉運多肽(Oatp)1和Oatp2,有機陰離子轉運體(Oat)2和有機暘離子轉運體(Oct)1的mRNA錶達.應用已知底物非索非那定、普伐他汀、甲氨蝶呤和阿昔洛韋評價轉運體的功能.將已知底物或受試藥物在4℃和37℃分彆與肝細胞孵育不同時間,LC-MS/MS定量測定細胞攝取量,攷察溫度和時間對底物攝取的影響.由濃度依賴的攝取實驗,計算得到Km、Vmax和主動攝取率等參數.在肝細胞模型上,將轉運體的暘性抑製劑與異鼠李素10 μmol·L-1和阿魏痠50 μmol· L-1共孵育2 min,觀察抑製劑對受試藥轉運的影響.結果 懸浮培養大鼠原代肝細胞上錶達有轉運體Oatp1,Oatp2,Oat2和Oct1,併能介導已知底物的主動攝取.轉運體的mRNA錶達水平隨著時間的延長而快速下降,4h的錶達水平約為0h的10％.轉運體對已知底物攝取活性也隨時間呈下降趨勢,但程度顯著低于錶達水平,4h的活性約為0h的28.7％ ～71.4％.在經驗證的肝細胞模型上,異鼠李素的4℃和37℃攝取無顯著差異,主動轉運率為14.6％.阿魏痠在37℃的攝取量顯著高于4℃,主動轉運率為84.1％；Oct暘性抑製劑奎尼丁100 μmol· L-1能顯著抑製阿魏痠的肝攝取,抑製率為64.9％.結論 成功建立瞭大鼠原代肝細胞攝取模型,併用底物進行瞭驗證.異鼠李素通過被動擴散進入肝細胞,阿魏痠的肝細胞攝取則以主動轉運為主.
목적 건립대서원대간세포섭취모형,평개이서리소화아위산적간세포섭취성질.방법 응용RT-qPCR기술측정0,0.5,2화4h현부배양원대대서간세포상섭취전운체유궤음리자전운다태(Oatp)1화Oatp2,유궤음리자전운체(Oat)2화유궤양리자전운체(Oct)1적mRNA표체.응용이지저물비색비나정、보벌타정、갑안접령화아석락위평개전운체적공능.장이지저물혹수시약물재4℃화37℃분별여간세포부육불동시간,LC-MS/MS정량측정세포섭취량,고찰온도화시간대저물섭취적영향.유농도의뢰적섭취실험,계산득도Km、Vmax화주동섭취솔등삼수.재간세포모형상,장전운체적양성억제제여이서리소10 μmol·L-1화아위산50 μmol· L-1공부육2 min,관찰억제제대수시약전운적영향.결과 현부배양대서원대간세포상표체유전운체Oatp1,Oatp2,Oat2화Oct1,병능개도이지저물적주동섭취.전운체적mRNA표체수평수착시간적연장이쾌속하강,4h적표체수평약위0h적10％.전운체대이지저물섭취활성야수시간정하강추세,단정도현저저우표체수평,4h적활성약위0h적28.7％ ～71.4％.재경험증적간세포모형상,이서리소적4℃화37℃섭취무현저차이,주동전운솔위14.6％.아위산재37℃적섭취량현저고우4℃,주동전운솔위84.1％；Oct양성억제제규니정100 μmol· L-1능현저억제아위산적간섭취,억제솔위64.9％.결론 성공건립료대서원대간세포섭취모형,병용저물진행료험증.이서리소통과피동확산진입간세포,아위산적간세포섭취칙이주동전운위주.
