中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
3期
379-384
,共6页
杨贤志%陈勤%陈庆林%金蓓蓓%叶海燕
楊賢誌%陳勤%陳慶林%金蓓蓓%葉海燕
양현지%진근%진경림%금배배%협해연
远志皂苷%β淀粉样蛋白片段1-40%PC12细胞%细胞凋亡%细胞色素c
遠誌皂苷%β澱粉樣蛋白片段1-40%PC12細胞%細胞凋亡%細胞色素c
원지조감%β정분양단백편단1-40%PC12세포%세포조망%세포색소c
tenuigenin%amyloid beta-protein fragment 1-40%PC12 cells%apoptosis%cytochrome c
目的 探讨远志皂苷抑制β淀粉样蛋白片段1-40(Aβ1-40)诱导的PC12细胞凋亡的作用机制.方法 采用聚集状的Aβ1-40 25 μmol·L-1诱导PC12细胞凋亡,然后将处理后的PC12细胞分为Aβ1-40模型组和远志皂苷50,100和200 μmol·L-1组,同时设正常细胞对照组.采用MTT比色法检测细胞存活率；膜联蛋白-Ⅴ和PI双染法检测细胞凋亡率；免疫细胞化学法检测细胞凋亡基因Bcl-2和Bax及细胞色素c(Cytc)表达阳性的细胞百分率；Western印迹法检测PC12细胞中Cyt c的表达水平.结果 与正常对照组比较,Aβ1-40模型组PC12细胞的存活率明显降低(P＜0.01),为(31±7)％；Bcl-2阳性表达细胞率降低(P＜0.01),为(23.9±1.9)％；Bax和Cyt c阳性表达细胞率升高(P＜0.01),分别为(79.0±3.7)％和(49.2±3.6)％,Bcl-2/Bax阳性表达细胞比值为0.30.与模型对照组比较,远志皂苷50,100和200 μmol·L-1作用24 h后,细胞存活率分别升高至(51±13)％,(64±7)％和(84±10)％(P＜0.01)；Bcl-2阳性率升高至(38.7±0.9)％,(53.7±1.6)％和(60.3±0.8)％(P＜0.01),Bax阳性率分别降低为(60.8±1.9)％,(41.5±2.2)％和(32.7±1.4)％(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值亦分别上升为0.64,1.29和1.84；Cyt c阳性率分别降低至(45.4±3.4)％,(30.2±2.2)％和(27.5±1.0)％(P＜O.05,P＜0.01).与正常对照组比较,模型组PC12细胞凋亡率和Cyt c蛋白表达水平亦明显升高(P＜0.01)；远志皂苷50,100和200μmol·L-1作用24 h,PC12细胞凋亡率和Cyt c表达水平较模型组均降低(P＜0.01).结论 远志皂苷对Aβ1-40诱导的PC12细胞凋亡具有明显的抑制作用,其作用机制可能是抑制Bax和Cyt c表达,增加Bcl-2表达和Bcl-2/Bax比值,从而阻断内源性细胞凋亡通路.
目的 探討遠誌皂苷抑製β澱粉樣蛋白片段1-40(Aβ1-40)誘導的PC12細胞凋亡的作用機製.方法 採用聚集狀的Aβ1-40 25 μmol·L-1誘導PC12細胞凋亡,然後將處理後的PC12細胞分為Aβ1-40模型組和遠誌皂苷50,100和200 μmol·L-1組,同時設正常細胞對照組.採用MTT比色法檢測細胞存活率；膜聯蛋白-Ⅴ和PI雙染法檢測細胞凋亡率；免疫細胞化學法檢測細胞凋亡基因Bcl-2和Bax及細胞色素c(Cytc)錶達暘性的細胞百分率；Western印跡法檢測PC12細胞中Cyt c的錶達水平.結果 與正常對照組比較,Aβ1-40模型組PC12細胞的存活率明顯降低(P＜0.01),為(31±7)％；Bcl-2暘性錶達細胞率降低(P＜0.01),為(23.9±1.9)％；Bax和Cyt c暘性錶達細胞率升高(P＜0.01),分彆為(79.0±3.7)％和(49.2±3.6)％,Bcl-2/Bax暘性錶達細胞比值為0.30.與模型對照組比較,遠誌皂苷50,100和200 μmol·L-1作用24 h後,細胞存活率分彆升高至(51±13)％,(64±7)％和(84±10)％(P＜0.01)；Bcl-2暘性率升高至(38.7±0.9)％,(53.7±1.6)％和(60.3±0.8)％(P＜0.01),Bax暘性率分彆降低為(60.8±1.9)％,(41.5±2.2)％和(32.7±1.4)％(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值亦分彆上升為0.64,1.29和1.84；Cyt c暘性率分彆降低至(45.4±3.4)％,(30.2±2.2)％和(27.5±1.0)％(P＜O.05,P＜0.01).與正常對照組比較,模型組PC12細胞凋亡率和Cyt c蛋白錶達水平亦明顯升高(P＜0.01)；遠誌皂苷50,100和200μmol·L-1作用24 h,PC12細胞凋亡率和Cyt c錶達水平較模型組均降低(P＜0.01).結論 遠誌皂苷對Aβ1-40誘導的PC12細胞凋亡具有明顯的抑製作用,其作用機製可能是抑製Bax和Cyt c錶達,增加Bcl-2錶達和Bcl-2/Bax比值,從而阻斷內源性細胞凋亡通路.
목적 탐토원지조감억제β정분양단백편단1-40(Aβ1-40)유도적PC12세포조망적작용궤제.방법 채용취집상적Aβ1-40 25 μmol·L-1유도PC12세포조망,연후장처리후적PC12세포분위Aβ1-40모형조화원지조감50,100화200 μmol·L-1조,동시설정상세포대조조.채용MTT비색법검측세포존활솔；막련단백-Ⅴ화PI쌍염법검측세포조망솔；면역세포화학법검측세포조망기인Bcl-2화Bax급세포색소c(Cytc)표체양성적세포백분솔；Western인적법검측PC12세포중Cyt c적표체수평.결과 여정상대조조비교,Aβ1-40모형조PC12세포적존활솔명현강저(P＜0.01),위(31±7)％；Bcl-2양성표체세포솔강저(P＜0.01),위(23.9±1.9)％；Bax화Cyt c양성표체세포솔승고(P＜0.01),분별위(79.0±3.7)％화(49.2±3.6)％,Bcl-2/Bax양성표체세포비치위0.30.여모형대조조비교,원지조감50,100화200 μmol·L-1작용24 h후,세포존활솔분별승고지(51±13)％,(64±7)％화(84±10)％(P＜0.01)；Bcl-2양성솔승고지(38.7±0.9)％,(53.7±1.6)％화(60.3±0.8)％(P＜0.01),Bax양성솔분별강저위(60.8±1.9)％,(41.5±2.2)％화(32.7±1.4)％(P＜0.01),Bcl-2/Bax비치역분별상승위0.64,1.29화1.84；Cyt c양성솔분별강저지(45.4±3.4)％,(30.2±2.2)％화(27.5±1.0)％(P＜O.05,P＜0.01).여정상대조조비교,모형조PC12세포조망솔화Cyt c단백표체수평역명현승고(P＜0.01)；원지조감50,100화200μmol·L-1작용24 h,PC12세포조망솔화Cyt c표체수평교모형조균강저(P＜0.01).결론 원지조감대Aβ1-40유도적PC12세포조망구유명현적억제작용,기작용궤제가능시억제Bax화Cyt c표체,증가Bcl-2표체화Bcl-2/Bax비치,종이조단내원성세포조망통로.
