中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
3期
346-351
,共6页
魏玉平%郭元芳%孙高英%王小元%刘永青%胡中一%毕文祥
魏玉平%郭元芳%孫高英%王小元%劉永青%鬍中一%畢文祥
위옥평%곽원방%손고영%왕소원%류영청%호중일%필문상
地钱素C%羟基衍生物%细胞周期%细胞凋亡
地錢素C%羥基衍生物%細胞週期%細胞凋亡
지전소C%간기연생물%세포주기%세포조망
marchantin C%hydroxyl derivatives%cell cycle%apoptosis
目的 对地钱素C(MC)羟基衍生物进行筛选,寻找具有高抗肿瘤活性的MC衍生物,并初步探讨其抗肿瘤的细胞与分子生物学机制.方法 用MTT法观察56种MC羟基衍生物对子宫颈癌HeLa细胞的毒性作用,筛选其中细胞毒作用最强的MC衍生物,并比较其与MC对HeLa细胞存活的抑制作用.用倒置显微镜、DAPI染色和DNA梯带检测其对细胞凋亡的影响.用流式细胞术检测其对细胞周期的影响.用Western印迹法检测其对细胞周期和凋亡相关蛋白表达的影响.结果 在56种MC衍生物中,F41对HeLa细胞毒性最强,抑制HeLa细胞存活的IC50为(11.31±2.13) μmol· L-1,明显低于MC[IC50为(17.19±3.28) μmol·L-1] (P＜0.01).F41和MC与HeLa细胞作用24,48和72 h,F41对HeLa细胞存活的抑制作用均明显强于MC(P＜0.05).形态学和DNA梯带检测显示,F41处理后,HeLa细胞皱缩变小,有空泡和凋亡小体出现,胞核浓缩变小,DNA电泳呈梯状条带.流式细胞分析显示,F41 15 μmol·L-1处理HeLa细胞24 h,G2/M期细胞占总细胞的比例为(43.8±3.0)％,明显高于对照组的(13.1±1.6)％(P＜0.01)；G1期细胞比例为(34.8±3.8)％,明显低于对照组的(63.6±5.5)％(P＜0.01).Western免疫印迹结果表明,F41可使HeLa细胞内磷酸化细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶1水平降低,细胞周期蛋白B1和P53蛋白表达增多.结论 F41可诱导HeLa细胞凋亡,抑制HeLa细胞分裂,其抗肿瘤活性可能强于MC.
目的 對地錢素C(MC)羥基衍生物進行篩選,尋找具有高抗腫瘤活性的MC衍生物,併初步探討其抗腫瘤的細胞與分子生物學機製.方法 用MTT法觀察56種MC羥基衍生物對子宮頸癌HeLa細胞的毒性作用,篩選其中細胞毒作用最彊的MC衍生物,併比較其與MC對HeLa細胞存活的抑製作用.用倒置顯微鏡、DAPI染色和DNA梯帶檢測其對細胞凋亡的影響.用流式細胞術檢測其對細胞週期的影響.用Western印跡法檢測其對細胞週期和凋亡相關蛋白錶達的影響.結果 在56種MC衍生物中,F41對HeLa細胞毒性最彊,抑製HeLa細胞存活的IC50為(11.31±2.13) μmol· L-1,明顯低于MC[IC50為(17.19±3.28) μmol·L-1] (P＜0.01).F41和MC與HeLa細胞作用24,48和72 h,F41對HeLa細胞存活的抑製作用均明顯彊于MC(P＜0.05).形態學和DNA梯帶檢測顯示,F41處理後,HeLa細胞皺縮變小,有空泡和凋亡小體齣現,胞覈濃縮變小,DNA電泳呈梯狀條帶.流式細胞分析顯示,F41 15 μmol·L-1處理HeLa細胞24 h,G2/M期細胞佔總細胞的比例為(43.8±3.0)％,明顯高于對照組的(13.1±1.6)％(P＜0.01)；G1期細胞比例為(34.8±3.8)％,明顯低于對照組的(63.6±5.5)％(P＜0.01).Western免疫印跡結果錶明,F41可使HeLa細胞內燐痠化細胞週期蛋白依賴性蛋白激酶1水平降低,細胞週期蛋白B1和P53蛋白錶達增多.結論 F41可誘導HeLa細胞凋亡,抑製HeLa細胞分裂,其抗腫瘤活性可能彊于MC.
목적 대지전소C(MC)간기연생물진행사선,심조구유고항종류활성적MC연생물,병초보탐토기항종류적세포여분자생물학궤제.방법 용MTT법관찰56충MC간기연생물대자궁경암HeLa세포적독성작용,사선기중세포독작용최강적MC연생물,병비교기여MC대HeLa세포존활적억제작용.용도치현미경、DAPI염색화DNA제대검측기대세포조망적영향.용류식세포술검측기대세포주기적영향.용Western인적법검측기대세포주기화조망상관단백표체적영향.결과 재56충MC연생물중,F41대HeLa세포독성최강,억제HeLa세포존활적IC50위(11.31±2.13) μmol· L-1,명현저우MC[IC50위(17.19±3.28) μmol·L-1] (P＜0.01).F41화MC여HeLa세포작용24,48화72 h,F41대HeLa세포존활적억제작용균명현강우MC(P＜0.05).형태학화DNA제대검측현시,F41처리후,HeLa세포추축변소,유공포화조망소체출현,포핵농축변소,DNA전영정제상조대.류식세포분석현시,F41 15 μmol·L-1처리HeLa세포24 h,G2/M기세포점총세포적비례위(43.8±3.0)％,명현고우대조조적(13.1±1.6)％(P＜0.01)；G1기세포비례위(34.8±3.8)％,명현저우대조조적(63.6±5.5)％(P＜0.01).Western면역인적결과표명,F41가사HeLa세포내린산화세포주기단백의뢰성단백격매1수평강저,세포주기단백B1화P53단백표체증다.결론 F41가유도HeLa세포조망,억제HeLa세포분렬,기항종류활성가능강우MC.
