中国药理学与毒理学杂志
中國藥理學與毒理學雜誌
중국약이학여독이학잡지
CHINESE JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND TOXICOLOGY
2013年
3期
315-320
,共6页
李泽慧%安超%胡凯文%周科华%段惠惠%唐民科
李澤慧%安超%鬍凱文%週科華%段惠惠%唐民科
리택혜%안초%호개문%주과화%단혜혜%당민과
总生物碱%浙贝母%多药耐药性%P-糖蛋白
總生物堿%浙貝母%多藥耐藥性%P-糖蛋白
총생물감%절패모%다약내약성%P-당단백
total alkaloid%Fritillaria thunbergii%multidrug resistance%P-glycoprotein
目的 研究浙贝母总生物碱(TAF)对人肺腺癌A549/顺铂(DDP)细胞DDP耐药性的逆转作用.方法 ①离体实验:采用MTT法观察TAF(12.5～200 mg·L-1)对A549和A549/DDP细胞的毒性作用；采用MTT法检测TAF 9 mg·L-1对A549/DDP细胞耐药的逆转作用,同时设环孢菌素A(Cys A)1 mg·L-1和汉防己甲素(Tet)1 mg·L-1为阳性对照；实时荧光定量PCR检测A549/DDP细胞多药耐药基因1(MDR1)mRNA相对表达；Western蛋白免疫印迹法检测A549/DDP细胞P-糖蛋白(P-gp)相对表达.②在体实验:制备BALB/c裸鼠A549/DDP移植瘤模型,随机分为模型对照、DDP 5 mg·kg-1、TAF2 mg· kg-1、DDP 5 mg·kg-1 +TAF0.5,1和2 mg·kg-1联用组,每两天ip给予DDP,每天ig给予TAF,持续13d,检测移植瘤体积和质量的变化.结果 TAF作用72 h抑制A549和A549/DDP细胞存活的IC50值分别为141±5和(298±22) mg· L-1；IC10值分别为15.3±1.9和(9.0±1.2)mg·L-1.DDP 0.01 ～100 mg·L-1与TAF 9 mg·L-1合用后,DDP抑制A549/DDP细胞存活的IC50值由(14.06±3.72) mg·L-1降至(0.79±0.14)mg·L-1,抑制A549细胞存活的IC50值无明显变化；TAF对A549/DDP细胞DDP耐药性的逆转倍数为17.80倍,高于Cys A(10.16倍)和Tet(14.05倍).TAF可明显降低A549/DDP细胞MDR1 mRNA及P-gp相对表达(P＜0.01).DDP 5 mg·kg-1体内抑瘤率为49.9％,与TAF 2 mg·kg-1合用后抑瘤率增至67.4％(P＜0.01).结论 TAF在体内外均可逆转A549/DDP细胞对DDP的耐药性,可降低MDR1 mRNA和P-gp蛋白表达.
目的 研究浙貝母總生物堿(TAF)對人肺腺癌A549/順鉑(DDP)細胞DDP耐藥性的逆轉作用.方法 ①離體實驗:採用MTT法觀察TAF(12.5～200 mg·L-1)對A549和A549/DDP細胞的毒性作用；採用MTT法檢測TAF 9 mg·L-1對A549/DDP細胞耐藥的逆轉作用,同時設環孢菌素A(Cys A)1 mg·L-1和漢防己甲素(Tet)1 mg·L-1為暘性對照；實時熒光定量PCR檢測A549/DDP細胞多藥耐藥基因1(MDR1)mRNA相對錶達；Western蛋白免疫印跡法檢測A549/DDP細胞P-糖蛋白(P-gp)相對錶達.②在體實驗:製備BALB/c裸鼠A549/DDP移植瘤模型,隨機分為模型對照、DDP 5 mg·kg-1、TAF2 mg· kg-1、DDP 5 mg·kg-1 +TAF0.5,1和2 mg·kg-1聯用組,每兩天ip給予DDP,每天ig給予TAF,持續13d,檢測移植瘤體積和質量的變化.結果 TAF作用72 h抑製A549和A549/DDP細胞存活的IC50值分彆為141±5和(298±22) mg· L-1；IC10值分彆為15.3±1.9和(9.0±1.2)mg·L-1.DDP 0.01 ～100 mg·L-1與TAF 9 mg·L-1閤用後,DDP抑製A549/DDP細胞存活的IC50值由(14.06±3.72) mg·L-1降至(0.79±0.14)mg·L-1,抑製A549細胞存活的IC50值無明顯變化；TAF對A549/DDP細胞DDP耐藥性的逆轉倍數為17.80倍,高于Cys A(10.16倍)和Tet(14.05倍).TAF可明顯降低A549/DDP細胞MDR1 mRNA及P-gp相對錶達(P＜0.01).DDP 5 mg·kg-1體內抑瘤率為49.9％,與TAF 2 mg·kg-1閤用後抑瘤率增至67.4％(P＜0.01).結論 TAF在體內外均可逆轉A549/DDP細胞對DDP的耐藥性,可降低MDR1 mRNA和P-gp蛋白錶達.
목적 연구절패모총생물감(TAF)대인폐선암A549/순박(DDP)세포DDP내약성적역전작용.방법 ①리체실험:채용MTT법관찰TAF(12.5～200 mg·L-1)대A549화A549/DDP세포적독성작용；채용MTT법검측TAF 9 mg·L-1대A549/DDP세포내약적역전작용,동시설배포균소A(Cys A)1 mg·L-1화한방기갑소(Tet)1 mg·L-1위양성대조；실시형광정량PCR검측A549/DDP세포다약내약기인1(MDR1)mRNA상대표체；Western단백면역인적법검측A549/DDP세포P-당단백(P-gp)상대표체.②재체실험:제비BALB/c라서A549/DDP이식류모형,수궤분위모형대조、DDP 5 mg·kg-1、TAF2 mg· kg-1、DDP 5 mg·kg-1 +TAF0.5,1화2 mg·kg-1련용조,매량천ip급여DDP,매천ig급여TAF,지속13d,검측이식류체적화질량적변화.결과 TAF작용72 h억제A549화A549/DDP세포존활적IC50치분별위141±5화(298±22) mg· L-1；IC10치분별위15.3±1.9화(9.0±1.2)mg·L-1.DDP 0.01 ～100 mg·L-1여TAF 9 mg·L-1합용후,DDP억제A549/DDP세포존활적IC50치유(14.06±3.72) mg·L-1강지(0.79±0.14)mg·L-1,억제A549세포존활적IC50치무명현변화；TAF대A549/DDP세포DDP내약성적역전배수위17.80배,고우Cys A(10.16배)화Tet(14.05배).TAF가명현강저A549/DDP세포MDR1 mRNA급P-gp상대표체(P＜0.01).DDP 5 mg·kg-1체내억류솔위49.9％,여TAF 2 mg·kg-1합용후억류솔증지67.4％(P＜0.01).결론 TAF재체내외균가역전A549/DDP세포대DDP적내약성,가강저MDR1 mRNA화P-gp단백표체.
