河南农业科学
河南農業科學
하남농업과학
JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES
2014年
3期
70-74
,共5页
红树林土壤%宏基因组文库%磷酸酯酶%克隆%表达%酶学性质
紅樹林土壤%宏基因組文庫%燐痠酯酶%剋隆%錶達%酶學性質
홍수림토양%굉기인조문고%린산지매%극륭%표체%매학성질
mangrove soil%metagenome library%phosphoesterases%cloning%expression%enzymatic characterization
利用宏基因组学的方法构建红树林土壤宏基因组文库,然后采用以三丁酸甘油酯为底物的功能筛选法对文库进行磷酸酯酶基因的筛选,并对磷酸酯酶基因进行克隆及酶学性质分析.经筛选获得1个具有酯水解活性的阳性克隆子,该克隆子含有1个1 545 bp的ORF,可编码514个氨基酸,命名为phop1545.该基因表达的蛋白属于新的酯水解酶类亚家族,其分子质量约为57 kD.该磷酸酯酶的最适pH值为5.5,温度为56℃,表明该酶为酸性磷酸酯酶且耐高温.
利用宏基因組學的方法構建紅樹林土壤宏基因組文庫,然後採用以三丁痠甘油酯為底物的功能篩選法對文庫進行燐痠酯酶基因的篩選,併對燐痠酯酶基因進行剋隆及酶學性質分析.經篩選穫得1箇具有酯水解活性的暘性剋隆子,該剋隆子含有1箇1 545 bp的ORF,可編碼514箇氨基痠,命名為phop1545.該基因錶達的蛋白屬于新的酯水解酶類亞傢族,其分子質量約為57 kD.該燐痠酯酶的最適pH值為5.5,溫度為56℃,錶明該酶為痠性燐痠酯酶且耐高溫.
이용굉기인조학적방법구건홍수림토양굉기인조문고,연후채용이삼정산감유지위저물적공능사선법대문고진행린산지매기인적사선,병대린산지매기인진행극륭급매학성질분석.경사선획득1개구유지수해활성적양성극륭자,해극륭자함유1개1 545 bp적ORF,가편마514개안기산,명명위phop1545.해기인표체적단백속우신적지수해매류아가족,기분자질량약위57 kD.해린산지매적최괄pH치위5.5,온도위56℃,표명해매위산성린산지매차내고온.
