医学研究杂志
醫學研究雜誌
의학연구잡지
JOURNAL OF MEDICAL RESEARCH
2014年
8期
83-86
,共4页
黄林静%黎关龙%郑梦晓%马迎春%金可可%王万铁
黃林靜%黎關龍%鄭夢曉%馬迎春%金可可%王萬鐵
황림정%려관룡%정몽효%마영춘%금가가%왕만철
低氧%容量激活性氯离子通道%p38MAPK%大鼠
低氧%容量激活性氯離子通道%p38MAPK%大鼠
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目的 探讨容量激活性氯离子通道(CLC3)在大鼠低氧性肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)中mRNA和蛋白表达的变化以及其与p38MAPK信号通路的关系.方法 取10只雄性SD大鼠,用酶消化法获得PASMCs并且进行原代培养,用小鼠抗大鼠SMα-actin免疫荧光细胞化学的方法进行鉴定.经培养鉴定的PASMCs随机分为:常氧组(N组,n=6),低氧组(H组,n=6),DMSO对照组(D组,n=6),SB203580干预组(SB组,n=6),Anisomycin干预组(A组,n=6),用免疫印迹技术检测CLC3蛋白的表达,半定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术测定CLC3 mRNA水平的表达.结果 与N组比较,H组PASMCs中CLC3 mRNA和蛋白的表达量均显著上调(P均＜0.01);与D组比较,SB组CLC3 mRNA和蛋白的表达均上调(P均＜0.01),A组mRNA的表达明显下调(P＜0.01),蛋白的表达轻微下调(P＞0.05).结论 低氧可上调大鼠PASMCs中CLC3 mRNA和蛋白的表达;p38MAPK通路抑制剂SB203580能上调PASMCs中CLC3 mRNA和蛋白的表达;p38MAPK通路激活剂Anisomycin可下调PASMCs中CLC3 mRNA和蛋白的表达.
目的 探討容量激活性氯離子通道(CLC3)在大鼠低氧性肺動脈平滑肌細胞(PASMCs)中mRNA和蛋白錶達的變化以及其與p38MAPK信號通路的關繫.方法 取10隻雄性SD大鼠,用酶消化法穫得PASMCs併且進行原代培養,用小鼠抗大鼠SMα-actin免疫熒光細胞化學的方法進行鑒定.經培養鑒定的PASMCs隨機分為:常氧組(N組,n=6),低氧組(H組,n=6),DMSO對照組(D組,n=6),SB203580榦預組(SB組,n=6),Anisomycin榦預組(A組,n=6),用免疫印跡技術檢測CLC3蛋白的錶達,半定量反轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)技術測定CLC3 mRNA水平的錶達.結果 與N組比較,H組PASMCs中CLC3 mRNA和蛋白的錶達量均顯著上調(P均＜0.01);與D組比較,SB組CLC3 mRNA和蛋白的錶達均上調(P均＜0.01),A組mRNA的錶達明顯下調(P＜0.01),蛋白的錶達輕微下調(P＞0.05).結論 低氧可上調大鼠PASMCs中CLC3 mRNA和蛋白的錶達;p38MAPK通路抑製劑SB203580能上調PASMCs中CLC3 mRNA和蛋白的錶達;p38MAPK通路激活劑Anisomycin可下調PASMCs中CLC3 mRNA和蛋白的錶達.
목적 탐토용량격활성록리자통도(CLC3)재대서저양성폐동맥평활기세포(PASMCs)중mRNA화단백표체적변화이급기여p38MAPK신호통로적관계.방법 취10지웅성SD대서,용매소화법획득PASMCs병차진행원대배양,용소서항대서SMα-actin면역형광세포화학적방법진행감정.경배양감정적PASMCs수궤분위:상양조(N조,n=6),저양조(H조,n=6),DMSO대조조(D조,n=6),SB203580간예조(SB조,n=6),Anisomycin간예조(A조,n=6),용면역인적기술검측CLC3단백적표체,반정량반전록-취합매련반응(RT-PCR)기술측정CLC3 mRNA수평적표체.결과 여N조비교,H조PASMCs중CLC3 mRNA화단백적표체량균현저상조(P균＜0.01);여D조비교,SB조CLC3 mRNA화단백적표체균상조(P균＜0.01),A조mRNA적표체명현하조(P＜0.01),단백적표체경미하조(P＞0.05).결론 저양가상조대서PASMCs중CLC3 mRNA화단백적표체;p38MAPK통로억제제SB203580능상조PASMCs중CLC3 mRNA화단백적표체;p38MAPK통로격활제Anisomycin가하조PASMCs중CLC3 mRNA화단백적표체.
