昆明医科大学学报
昆明醫科大學學報
곤명의과대학학보
Journal of Kunming Medical University
2014年
8期
12-15
,共4页
郑志%牛华%陶瑞%张桂前%范欣%高玉红%孙鹥
鄭誌%牛華%陶瑞%張桂前%範訢%高玉紅%孫鹥
정지%우화%도서%장계전%범흔%고옥홍%손예
RNA干扰%慢病毒载体%Syncytin基因%Jurkat细胞系
RNA榦擾%慢病毒載體%Syncytin基因%Jurkat細胞繫
RNA간우%만병독재체%Syncytin기인%Jurkat세포계
RNAi%Lentiviral%vector%Syncytin%gene%Jurkat%cell%line
目的 构建PGC-LV-syncytin慢病毒载体并建立Syncytin基因表达下调的Jurkat细胞系.方法 利用RNA干扰序列软件设计并筛选有效干扰序列,将构建好的Syncytin表达质粒与慢病毒包装质粒共转染至包装细胞293T,包装产生病毒颗粒后感染Jurkat细胞,获得Syncytin稳定沉默的细胞系.荧光显微镜下观察感染效率,分别使用Real time PCR和Annexin V-APC单染法结合流式细胞仪检测目的基因表达水平和细胞凋亡率.结果成功构建了具有Syncytin干扰效果的慢病毒载体及其稳定沉默的Jurkat细胞系.结论 该细胞系的构建为进一步研究Syncytin基因在白血病的功能提供了细胞模型.
目的 構建PGC-LV-syncytin慢病毒載體併建立Syncytin基因錶達下調的Jurkat細胞繫.方法 利用RNA榦擾序列軟件設計併篩選有效榦擾序列,將構建好的Syncytin錶達質粒與慢病毒包裝質粒共轉染至包裝細胞293T,包裝產生病毒顆粒後感染Jurkat細胞,穫得Syncytin穩定沉默的細胞繫.熒光顯微鏡下觀察感染效率,分彆使用Real time PCR和Annexin V-APC單染法結閤流式細胞儀檢測目的基因錶達水平和細胞凋亡率.結果成功構建瞭具有Syncytin榦擾效果的慢病毒載體及其穩定沉默的Jurkat細胞繫.結論 該細胞繫的構建為進一步研究Syncytin基因在白血病的功能提供瞭細胞模型.
목적 구건PGC-LV-syncytin만병독재체병건립Syncytin기인표체하조적Jurkat세포계.방법 이용RNA간우서렬연건설계병사선유효간우서렬,장구건호적Syncytin표체질립여만병독포장질립공전염지포장세포293T,포장산생병독과립후감염Jurkat세포,획득Syncytin은정침묵적세포계.형광현미경하관찰감염효솔,분별사용Real time PCR화Annexin V-APC단염법결합류식세포의검측목적기인표체수평화세포조망솔.결과성공구건료구유Syncytin간우효과적만병독재체급기은정침묵적Jurkat세포계.결론 해세포계적구건위진일보연구Syncytin기인재백혈병적공능제공료세포모형.
