中国现代医生
中國現代醫生
중국현대의생
CHINA MODERN DOCTOR
2014年
21期
5-7
,共3页
Ascl2%HEK293T细胞%Tfh细胞%自身免疫性疾病
Ascl2%HEK293T細胞%Tfh細胞%自身免疫性疾病
Ascl2%HEK293T세포%Tfh세포%자신면역성질병
目的 构建真核表达载体pIRES2-AcGFP1-Ascl2,并在真核细胞HEK293T细胞中表达,为今后研究Ascl2基因在Tfh细胞的相关分子机制奠定实验基础.方法 PCR方法扩增健康人外周血单个核细胞中Ascl2基因,连接至pIRES2-AcGFP1质粒的多克隆位点中,构建pIRES2-AcGFP1-Ascl2重组质粒.通过脂质体转染法对HEK293T细胞进行转染.Realtime-PCR及Westernblot方法分析转染pIRES2-AcGFP1-Ascl2重组质粒的HEK293T细胞中Ascl2表达情况.结果 经Realtime-PCR及Westernblot方法,证实Ascl2基因能够在HEK293T细胞中正确表达.结论 成功建立表达Ascl2基因的pIRES2-AcGFP1-Ascl2重组质粒,并能在HEK293T细胞中表达,为进一步研究Ascl2在自身免疫性疾病中Tfh细胞的相关机制奠定了实验基础.
目的 構建真覈錶達載體pIRES2-AcGFP1-Ascl2,併在真覈細胞HEK293T細胞中錶達,為今後研究Ascl2基因在Tfh細胞的相關分子機製奠定實驗基礎.方法 PCR方法擴增健康人外週血單箇覈細胞中Ascl2基因,連接至pIRES2-AcGFP1質粒的多剋隆位點中,構建pIRES2-AcGFP1-Ascl2重組質粒.通過脂質體轉染法對HEK293T細胞進行轉染.Realtime-PCR及Westernblot方法分析轉染pIRES2-AcGFP1-Ascl2重組質粒的HEK293T細胞中Ascl2錶達情況.結果 經Realtime-PCR及Westernblot方法,證實Ascl2基因能夠在HEK293T細胞中正確錶達.結論 成功建立錶達Ascl2基因的pIRES2-AcGFP1-Ascl2重組質粒,併能在HEK293T細胞中錶達,為進一步研究Ascl2在自身免疫性疾病中Tfh細胞的相關機製奠定瞭實驗基礎.
목적 구건진핵표체재체pIRES2-AcGFP1-Ascl2,병재진핵세포HEK293T세포중표체,위금후연구Ascl2기인재Tfh세포적상관분자궤제전정실험기출.방법 PCR방법확증건강인외주혈단개핵세포중Ascl2기인,련접지pIRES2-AcGFP1질립적다극륭위점중,구건pIRES2-AcGFP1-Ascl2중조질립.통과지질체전염법대HEK293T세포진행전염.Realtime-PCR급Westernblot방법분석전염pIRES2-AcGFP1-Ascl2중조질립적HEK293T세포중Ascl2표체정황.결과 경Realtime-PCR급Westernblot방법,증실Ascl2기인능구재HEK293T세포중정학표체.결론 성공건립표체Ascl2기인적pIRES2-AcGFP1-Ascl2중조질립,병능재HEK293T세포중표체,위진일보연구Ascl2재자신면역성질병중Tfh세포적상관궤제전정료실험기출.
