CAJ | 학술논문

目的观察外源性1-磷酸神经鞘氨醇(sphingosine 1-phosphate,S1P)对大鼠骨骼肌成肌细胞增殖的影响.方法分离和培养大鼠骨骼肌成肌细胞,通过制备S1P脂质体使S1P转运到骨骼肌成肌细胞内或直接加入外源性S1P,采用3H-TdR渗入法检测S1P进入细胞内和在细胞外对骨骼肌成肌细胞DNA的合成；进一步使用磷酸神经鞘氨醇激酶(sphingosine kinase,SphK)活性抑制剂N,N-二甲基鞘氨醇(N,N-dimethyl sphingosine,DMS)和HACPT[2-(p-hydroxyanilino)-4-(p-chlorophenyl)thiazole],观察其对S1P促进DNA合成作用的影响.结果 S1P脂质体转入可明显促进骨骼肌成肌细胞DNA合成.100～1 000 nmol/L剂量范围内S1P脂质体使细胞胸腺嘧啶核苷(3 H-TdR)的摄入量较对照组增加12.3％～50.7％(P＜0.01),并与剂量呈正相关.该促进作用不会被SphK活性抑制剂DMS和HACPT所阻断.S1P直接加入培养液同样能促进细胞DNA合成(P＜0.01),500和1 000 nmol/L剂量组3 H-TdR的摄入量较对照组分别增加18.8％(P＜0.05)和26.5％(P＜0.05),增幅低于同剂量的S1P脂质体.该促进作用可被DMS和HACPT所阻断.结论外源性S1P可促进体外培养的大鼠骨骼肌成肌细胞增殖,其作用可能与细胞内SphK活性增加引起细胞内S1P生成增多.
목적 관찰외원성1-린산신경초안순(sphingosine 1-phosphate,S1P)대대서골격기성기세포증식적영향.방법 분리화배양대서골격기성기세포,통과제비S1P지질체사S1P전운도골격기성기세포내혹직접가입외원성S1P,채용3H-TdR삼입법검측S1P진입세포내화재세포외대골격기성기세포DNA적합성；진일보사용린산신경초안순격매(sphingosine kinase,SphK)활성억제제N,N-이갑기초안순(N,N-dimethyl sphingosine,DMS)화HACPT[2-(p-hydroxyanilino)-4-(p-chlorophenyl)thiazole],관찰기대S1P촉진DNA합성작용적영향.결과 S1P지질체전입가명현촉진골격기성기세포DNA합성.100～1 000 nmol/L제량범위내S1P지질체사세포흉선밀정핵감(3 H-TdR)적섭입량교대조조증가12.3％～50.7％(P＜0.01),병여제량정정상관.해촉진작용불회피SphK활성억제제DMS화HACPT소조단.S1P직접가입배양액동양능촉진세포DNA합성(P＜0.01),500화1 000 nmol/L제량조3 H-TdR적섭입량교대조조분별증가18.8％(P＜0.05)화26.5％(P＜0.05),증폭저우동제량적S1P지질체.해촉진작용가피DMS화HACPT소조단.결론 외원성S1P가촉진체외배양적대서골격기성기세포증식,기작용가능여세포내SphK활성증가인기세포내S1P생성증다.