CAJ | 학술논문

目的建立一种可靠、灵敏的DHPLC方法检测并定量线粒体DNA 1555A>G异质性突变。方法采用克隆技术构建已知突变负荷的标准品，以此为实验材料，对影响DHPLC仪器检测准确性的主要因素进行探索和优化，建立最佳的DHPLC检测条件。收集氨基糖甙类药物性耳聋患者10例，听力正常的家属成员40例，使用DHPLC方法检测并定量其异质性水平，并与传统的检测方法PCR-RFLP和直接测序法进行对比验证。结果获得已知突变负荷的标准品，建立了一套最优的DHPLC方法检测并定量1555A>G异质性突变。在10例患者中，DHPLC共检出6例异质性突变个体，而利用传统的检测方法只检出4例；此外，在经传统检测方法确认为野生型的40例对照中，采用DHPLC方法又检出2例低水平的异质性突变个体。结论DHPLC可以作为一种可靠、灵敏的筛选异质性突变的方法，能够快速准确的对线粒体DNA 1555A>G异质性突变进行检测并定量。
목적건립일충가고、령민적DHPLC방법검측병정량선립체DNA 1555A>G이질성돌변。방법채용극륭기술구건이지돌변부하적표준품，이차위실험재료，대영향DHPLC의기검측준학성적주요인소진행탐색화우화，건립최가적DHPLC검측조건。수집안기당대류약물성이롱환자10례，은력정상적가속성원40례，사용DHPLC방법검측병정량기이질성수평，병여전통적검측방법PCR-RFLP화직접측서법진행대비험증。결과획득이지돌변부하적표준품，건립료일투최우적DHPLC방법검측병정량1555A>G이질성돌변。재10례환자중，DHPLC공검출6례이질성돌변개체，이이용전통적검측방법지검출4례；차외，재경전통검측방법학인위야생형적40례대조중，채용DHPLC방법우검출2례저수평적이질성돌변개체。결론DHPLC가이작위일충가고、령민적사선이질성돌변적방법，능구쾌속준학적대선립체DNA 1555A>G이질성돌변진행검측병정량。