CAJ | 학술논문

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간세포%간세포배양여분화%내피조세포%필격렬동%증식%양화물매체증식물격활수체γ%신호통로%내피세포%혈관형성%간세포도편문장
stem cells%stem cell culture and differentiation%endothelial progenitor cells%pioglitazone%proliferation%peroxisome proliferative activated receptor Y%signaling pathway%endothelial cells%angiogenesis%stem cell photograohs-containing paper

背景:内皮祖细胞具有增殖、迁移和分化为内皮细胞的特征,对冠状动脉硬化性心脏病及糖尿病心血管并发症的发生、发展可能起着重要作用.目的:探讨选择性过氧化物酶体增殖物激活受体Y激动剂吡格列酮对大鼠骨髓内皮祖细胞增殖的影响及相关机制.方法:①采用密度梯度离心法和差速贴壁法培养大鼠骨髓内皮祖细胞,置于含0,1,10,50,100,200 μmol/L吡格列酮的培养基中培养,观察吡格列酮促进内皮祖细胞增殖的最佳浓度.②将培养7d的内皮祖细胞随机分5组:对照组加含二甲基亚砜的培养液；吡格列酮组加入50 μmol/L吡格列酮；PPAR-γ拮抗剂组加入50 μmol/L吡格列酮及10 μmol/L过氧化物酶体增殖物激活受体Y拮抗剂GW9662；PI3K/Akt阻滞剂组加入50 μmol/L吡格列酮及50 μmol/L磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通道阻滞剂Wortmannin;ERK阻滞剂组加入50 μmol/L吡格列酮及20 μmol/L细胞外调节蛋白激酶通道阻滞剂PD98059,观察不同组内皮祖细胞的增殖情况.结果与结论:倒置显微镜下见培养前4d细胞增殖不明显,第5-10天迅速增殖,并可见细胞集落及线状结构形成,第10天可达80％融合.培养第7天的内皮祖细胞具有吞噬Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白和FITC标记的荆豆凝集素1的功能.10-200 μmol/L的吡格列酮均可明显促进内皮祖细胞的增殖(P＜0.01),以50 μmol/L吡格列酮的作用最明显.进一步阻断相关信号通路发现,Wortmannin和GW9662可明显拮抗吡格列酮的促细胞增殖作用,而PD98059对吡格列酮的作用无影响.说明吡格列酮促进大鼠骨髓内皮祖细胞增殖的作用是通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路介导的.
배경:내피조세포구유증식、천이화분화위내피세포적특정,대관상동맥경화성심장병급당뇨병심혈관병발증적발생、발전가능기착중요작용.목적:탐토선택성과양화물매체증식물격활수체Y격동제필격렬동대대서골수내피조세포증식적영향급상관궤제.방법:①채용밀도제도리심법화차속첩벽법배양대서골수내피조세포,치우함0,1,10,50,100,200 μmol/L필격렬동적배양기중배양,관찰필격렬동촉진내피조세포증식적최가농도.②장배양7d적내피조세포수궤분5조:대조조가함이갑기아풍적배양액；필격렬동조가입50 μmol/L필격렬동；PPAR-γ길항제조가입50 μmol/L필격렬동급10 μmol/L과양화물매체증식물격활수체Y길항제GW9662；PI3K/Akt조체제조가입50 μmol/L필격렬동급50 μmol/L린지선기순3-격매/단백격매B통도조체제Wortmannin;ERK조체제조가입50 μmol/L필격렬동급20 μmol/L세포외조절단백격매통도조체제PD98059,관찰불동조내피조세포적증식정황.결과여결론:도치현미경하견배양전4d세포증식불명현,제5-10천신속증식,병가견세포집락급선상결구형성,제10천가체80％융합.배양제7천적내피조세포구유탄서Dil표기적을선화저밀도지단백화FITC표기적형두응집소1적공능.10-200 μmol/L적필격렬동균가명현촉진내피조세포적증식(P＜0.01),이50 μmol/L필격렬동적작용최명현.진일보조단상관신호통로발현,Wortmannin화GW9662가명현길항필격렬동적촉세포증식작용,이PD98059대필격렬동적작용무영향.설명필격렬동촉진대서골수내피조세포증식적작용시통과린지선기순3-격매/단백격매B신호통로개도적.