CAJ | 학술논문

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간세포%간세포배양여분화%갑상방선상관단백%인제안자위단백%골후간세포%증식%분화%증식세포핵항원%기타기금%간세포도편문장
stem cells%stem cell culture and differentiation%parathyroid hormone-related protein%Indian hedgehog protein%precartilaginous stem cells%proliferation%differentiation%proliferating cell nuclear antigen%other grants-supported paper%stem cell p

背景:甲状旁腺素相关蛋白-印第安刺猬蛋白两者相互作用调节着骨骺区软骨的分化成熟及增殖,促使骨骺区细胞处于一种相对稳定的状态.目的:分析甲状旁腺相关蛋白亚基因PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)和PTHrP(107-139)对骨骺干细胞的调控作用以及PTHrP(107-139)与其他调控因子的影响.方法:用脂质体介导的基因转染技术将质粒pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)和pTRE-PTHrP(107-139)分别转染pTet-on骨骺干细胞株,放入诱导分化培养基中进行培养,加入1 mg/L的强力霉素进行诱导,以RT-PCR的方法检测增殖细胞核抗原基因的表达变化.再次将质粒pTRE-PTHrP(107-139)转染pTet-on骨骺干细胞株,加入不同浓度的强力霉素进行诱导,应用RT-PCR的方法检测Ⅱ型胶原、X型胶原、印第安刺猬蛋白、Ptc、Sox9、骨形态发生蛋白6基因的表达变化.结果与结论:强力霉素诱导的质粒pTRE-PTHrP(107-139)转染组的增殖细胞核抗原表达明显高于质粒pTRE-PTHrP(1-36)转染组和质粒pTRE-PTHrP(38-94)转染组；在强力霉素诱导的质粒pTRE-PTHrP(107-139)转染组中Ⅱ型胶原、Sox-9表达明显增强,Ihh表达未见明显变化,而Ptc、X型胶原、骨形态发生蛋白6表达明显降低.而且其表达量与强力霉素存在剂量依赖性.提示PTHrP (107-139)可能是通过调控Sox-9、Ptc、骨形态发生蛋白6的表达来促进骨骺干细胞增殖并抑制其分化的,而PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)对前癌干细胞的增殖并无明显作用.pTet-on质粒系统在前癌干细胞能有效的调控外来基因的表达.
배경:갑상방선소상관단백-인제안자위단백량자상호작용조절착골후구연골적분화성숙급증식,촉사골후구세포처우일충상대은정적상태.목적:분석갑상방선상관단백아기인PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)화PTHrP(107-139)대골후간세포적조공작용이급PTHrP(107-139)여기타조공인자적영향.방법:용지질체개도적기인전염기술장질립pTRE-PTHrP(1-36)、pTRE-PTHrP(38-94)화pTRE-PTHrP(107-139)분별전염pTet-on골후간세포주,방입유도분화배양기중진행배양,가입1 mg/L적강력매소진행유도,이RT-PCR적방법검측증식세포핵항원기인적표체변화.재차장질립pTRE-PTHrP(107-139)전염pTet-on골후간세포주,가입불동농도적강력매소진행유도,응용RT-PCR적방법검측Ⅱ형효원、X형효원、인제안자위단백、Ptc、Sox9、골형태발생단백6기인적표체변화.결과여결론:강력매소유도적질립pTRE-PTHrP(107-139)전염조적증식세포핵항원표체명현고우질립pTRE-PTHrP(1-36)전염조화질립pTRE-PTHrP(38-94)전염조；재강력매소유도적질립pTRE-PTHrP(107-139)전염조중Ⅱ형효원、Sox-9표체명현증강,Ihh표체미견명현변화,이Ptc、X형효원、골형태발생단백6표체명현강저.이차기표체량여강력매소존재제량의뢰성.제시PTHrP (107-139)가능시통과조공Sox-9、Ptc、골형태발생단백6적표체래촉진골후간세포증식병억제기분화적,이PTHrP(1-36)、PTHrP(38-94)대전암간세포적증식병무명현작용.pTet-on질립계통재전암간세포능유효적조공외래기인적표체.