中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2014年
4期
500-505
,共6页
李元宏%李卫萍%任来峰%宋维芳
李元宏%李衛萍%任來峰%宋維芳
리원굉%리위평%임래봉%송유방
miR-103%肝癌%增殖%FBW7
miR-103%肝癌%增殖%FBW7
miR-103%간암%증식%FBW7
miR-103%hepatoma%proliferation%FBW7
[目的]研究miR-103对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制.[方法]Real time PCR方法检测miR-103在肝癌组织和细胞中的表达.将miR-103 inhibitor转染到肝癌细胞中,分为实验组(转染miR-103 inhibitor)和对照组(转染Negative Control),通过MTT实验检测肝癌细胞的增殖变化.Real time PCR和Western blotting检测转染miR-103 mimics后肝癌细胞中FBW7 mRNA和蛋白的表达变化.通过重荧光素酶报告基因实验检测转染miR-103 mimics或inhibitor后FBW7-3'UTR活性的变化.[结果]Real time PCR结果显示miR-103在肝癌组织和HepG2细胞系中均高于癌旁组织和L02肝细胞系(P＜0.05).MTT实验结果显示,转染miR-103 inhibitor实验组肝癌细胞的存活细胞数低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).Real time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-103 mimics实验组肝癌细胞中FBW7的mRNA和蛋白表达水平都低于对照组.重荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,转染miR-103 mimics的实验组中FBW7-3' UTR报告基因活性显著降低(P＜0.05);与对照组相比,转染miR-103 inhibitor的实验组中FBW7-3' UTR活性显著升高(P＜0.05).进一步实验发现,转染FBW7后能显著下调由miR-103 mimics所引起的细胞增殖作用.[结论]miR-103可以通过抑制FBW7的表达来促进肝癌细胞增殖.
[目的]研究miR-103對肝癌細胞增殖功能的影響及其作用機製.[方法]Real time PCR方法檢測miR-103在肝癌組織和細胞中的錶達.將miR-103 inhibitor轉染到肝癌細胞中,分為實驗組(轉染miR-103 inhibitor)和對照組(轉染Negative Control),通過MTT實驗檢測肝癌細胞的增殖變化.Real time PCR和Western blotting檢測轉染miR-103 mimics後肝癌細胞中FBW7 mRNA和蛋白的錶達變化.通過重熒光素酶報告基因實驗檢測轉染miR-103 mimics或inhibitor後FBW7-3'UTR活性的變化.[結果]Real time PCR結果顯示miR-103在肝癌組織和HepG2細胞繫中均高于癌徬組織和L02肝細胞繫(P＜0.05).MTT實驗結果顯示,轉染miR-103 inhibitor實驗組肝癌細胞的存活細胞數低于對照組,差異有統計學意義(P＜0.05).Real time PCR和Western blotting結果顯示,轉染miR-103 mimics實驗組肝癌細胞中FBW7的mRNA和蛋白錶達水平都低于對照組.重熒光素酶報告基因實驗結果顯示,與對照組相比,轉染miR-103 mimics的實驗組中FBW7-3' UTR報告基因活性顯著降低(P＜0.05);與對照組相比,轉染miR-103 inhibitor的實驗組中FBW7-3' UTR活性顯著升高(P＜0.05).進一步實驗髮現,轉染FBW7後能顯著下調由miR-103 mimics所引起的細胞增殖作用.[結論]miR-103可以通過抑製FBW7的錶達來促進肝癌細胞增殖.
[목적]연구miR-103대간암세포증식공능적영향급기작용궤제.[방법]Real time PCR방법검측miR-103재간암조직화세포중적표체.장miR-103 inhibitor전염도간암세포중,분위실험조(전염miR-103 inhibitor)화대조조(전염Negative Control),통과MTT실험검측간암세포적증식변화.Real time PCR화Western blotting검측전염miR-103 mimics후간암세포중FBW7 mRNA화단백적표체변화.통과중형광소매보고기인실험검측전염miR-103 mimics혹inhibitor후FBW7-3'UTR활성적변화.[결과]Real time PCR결과현시miR-103재간암조직화HepG2세포계중균고우암방조직화L02간세포계(P＜0.05).MTT실험결과현시,전염miR-103 inhibitor실험조간암세포적존활세포수저우대조조,차이유통계학의의(P＜0.05).Real time PCR화Western blotting결과현시,전염miR-103 mimics실험조간암세포중FBW7적mRNA화단백표체수평도저우대조조.중형광소매보고기인실험결과현시,여대조조상비,전염miR-103 mimics적실험조중FBW7-3' UTR보고기인활성현저강저(P＜0.05);여대조조상비,전염miR-103 inhibitor적실험조중FBW7-3' UTR활성현저승고(P＜0.05).진일보실험발현,전염FBW7후능현저하조유miR-103 mimics소인기적세포증식작용.[결론]miR-103가이통과억제FBW7적표체래촉진간암세포증식.
