南京林业大学学报（自然科学版）
南京林業大學學報（自然科學版）
남경임업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NANJING FORESTRY UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2014年
4期
107-112
,共6页
李飞%解静聪%李琦%张雪松%赵林果
李飛%解靜聰%李琦%張雪鬆%趙林果
리비%해정총%리기%장설송%조림과
定点突变%木聚糖酶%精氨酸%热稳定性
定點突變%木聚糖酶%精氨痠%熱穩定性
정점돌변%목취당매%정안산%열은정성
site-directed mutagenesis%xylanase%arginine%thermostability
为提高木聚糖酶的热稳定性,通过定点突变的方法,在来源于黑曲霉Aspergillus niger nl-1的木聚糖酶XynB分子Ser/Thr平面上引入5个精氨酸,实现了突变酶在毕赤酵母中的表达.通过酶学性质的研究表明,突变酶XynB-104和XynB-77的最适反应温度为50℃,且与原酶相比相对酶活力得到显著提高.在存在底物的情况下,50℃热处理2h,突变酶XynB-104和XynB-77残余酶活力较原酶的相对转化效率由26％提高到80％左右.突变酶XynB-104的最适反应pH与原酶一致,而突变酶XynB-77最适pH由5.0提高到5.5.结果表明,在木聚糖酶分子Ser/Thr平面不同折叠片引入精氨酸可以增强酶结构的稳定性,特别是能显著提高热稳定性.
為提高木聚糖酶的熱穩定性,通過定點突變的方法,在來源于黑麯黴Aspergillus niger nl-1的木聚糖酶XynB分子Ser/Thr平麵上引入5箇精氨痠,實現瞭突變酶在畢赤酵母中的錶達.通過酶學性質的研究錶明,突變酶XynB-104和XynB-77的最適反應溫度為50℃,且與原酶相比相對酶活力得到顯著提高.在存在底物的情況下,50℃熱處理2h,突變酶XynB-104和XynB-77殘餘酶活力較原酶的相對轉化效率由26％提高到80％左右.突變酶XynB-104的最適反應pH與原酶一緻,而突變酶XynB-77最適pH由5.0提高到5.5.結果錶明,在木聚糖酶分子Ser/Thr平麵不同摺疊片引入精氨痠可以增彊酶結構的穩定性,特彆是能顯著提高熱穩定性.
위제고목취당매적열은정성,통과정점돌변적방법,재래원우흑곡매Aspergillus niger nl-1적목취당매XynB분자Ser/Thr평면상인입5개정안산,실현료돌변매재필적효모중적표체.통과매학성질적연구표명,돌변매XynB-104화XynB-77적최괄반응온도위50℃,차여원매상비상대매활력득도현저제고.재존재저물적정황하,50℃열처리2h,돌변매XynB-104화XynB-77잔여매활력교원매적상대전화효솔유26％제고도80％좌우.돌변매XynB-104적최괄반응pH여원매일치,이돌변매XynB-77최괄pH유5.0제고도5.5.결과표명,재목취당매분자Ser/Thr평면불동절첩편인입정안산가이증강매결구적은정성,특별시능현저제고열은정성.
