现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2013年
9期
1941-1945
,共5页
沈建军%李斌%龙敏%姜南艳%林芳%何婷%张惠中
瀋建軍%李斌%龍敏%薑南豔%林芳%何婷%張惠中
침건군%리빈%룡민%강남염%림방%하정%장혜중
RNA干扰%存活素%生存素%凋亡%前列腺癌
RNA榦擾%存活素%生存素%凋亡%前列腺癌
RNA간우%존활소%생존소%조망%전렬선암
RNA interference%Survivin%Livin%apoptosis%prostate cancer
目的:构建含Survivin基因启动子的、肿瘤特异性Survivin、Livin共沉默RNAi载体,研究该载体在前列腺癌细胞中的RNA沉默作用.方法:运用分子克隆技术,选取Survivin、Livin基因RNAi特异性序列,构建以Survivin、Livin基因为靶点的、含Survivin启动子的CGM30 miR-30 shRNA载体.经测序验证,用脂质体法转染PC-3细胞,RT-PCR、免疫印迹实验检测Survivin、Livin的表达变化,并用流式细胞术检测转染后PC-3细胞的凋亡变化.结果:构建的共沉默RNAi重组载体转染PC-3细胞后,Survivin、Livin基因在mRNA和蛋白水平上的表达均明显下调(P＜0.01),且转染后的细胞凋亡增加了约15％,而正常前列腺上皮BPH-1细胞中则无此作用.结论:成功构建了含Survivin启动子、特异性沉默Survivin、Livin基因表达的RNAi共沉默载体CGM30-SP-sw-liv,转染该重组质粒后可促进肿瘤细胞的凋亡.
目的:構建含Survivin基因啟動子的、腫瘤特異性Survivin、Livin共沉默RNAi載體,研究該載體在前列腺癌細胞中的RNA沉默作用.方法:運用分子剋隆技術,選取Survivin、Livin基因RNAi特異性序列,構建以Survivin、Livin基因為靶點的、含Survivin啟動子的CGM30 miR-30 shRNA載體.經測序驗證,用脂質體法轉染PC-3細胞,RT-PCR、免疫印跡實驗檢測Survivin、Livin的錶達變化,併用流式細胞術檢測轉染後PC-3細胞的凋亡變化.結果:構建的共沉默RNAi重組載體轉染PC-3細胞後,Survivin、Livin基因在mRNA和蛋白水平上的錶達均明顯下調(P＜0.01),且轉染後的細胞凋亡增加瞭約15％,而正常前列腺上皮BPH-1細胞中則無此作用.結論:成功構建瞭含Survivin啟動子、特異性沉默Survivin、Livin基因錶達的RNAi共沉默載體CGM30-SP-sw-liv,轉染該重組質粒後可促進腫瘤細胞的凋亡.
목적:구건함Survivin기인계동자적、종류특이성Survivin、Livin공침묵RNAi재체,연구해재체재전렬선암세포중적RNA침묵작용.방법:운용분자극륭기술,선취Survivin、Livin기인RNAi특이성서렬,구건이Survivin、Livin기인위파점적、함Survivin계동자적CGM30 miR-30 shRNA재체.경측서험증,용지질체법전염PC-3세포,RT-PCR、면역인적실험검측Survivin、Livin적표체변화,병용류식세포술검측전염후PC-3세포적조망변화.결과:구건적공침묵RNAi중조재체전염PC-3세포후,Survivin、Livin기인재mRNA화단백수평상적표체균명현하조(P＜0.01),차전염후적세포조망증가료약15％,이정상전렬선상피BPH-1세포중칙무차작용.결론:성공구건료함Survivin계동자、특이성침묵Survivin、Livin기인표체적RNAi공침묵재체CGM30-SP-sw-liv,전염해중조질립후가촉진종류세포적조망.
